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更新時間:2024-11-04
小鼠脊髓神經元細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
脊髓組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 神經元細胞樣 | YS-01X7540 |
細胞簡介:
小鼠脊髓神經元分離自脊髓組織;脊髓是細細的管束狀的神經結構,位于脊柱的椎管內且被脊椎保護;是源自腦的中樞神經系統延伸部分。中樞神經系統的細胞依靠復雜的聯系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經信息。人和脊椎動物中樞神經系統的一部分,在椎管里面,上端連接延髓,兩旁發出成對的神經,分布到四肢、體壁和內臟。脊髓的內部有一個H形(蝴蝶型)灰質區,主要由神經細胞構成;在灰質區周圍為白質區,主要由有髓神經纖維組成;脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發出許多成對的神經(稱為脊神經)分布到全身皮膚、肌肉和內臟器官。脊髓是周圍神經與腦之間的通路,也是許多簡單反射活動的低級中樞。按脊神經的出入可把脊髓也分為相應的31節,31對脊神經就是由不同的脊椎發出的。神經系統最基本的結構和功能單位是神經元,即神經細胞,其大小和外觀在中樞神經系統中差異很大。但都具有胞體和樹突、軸突。胞體又叫核周體,內含神經絲、微管、內質網、游離核糖體和一個有明顯核仁的核。一些大神經元突起的粗面內質網可用Nissl染色顯示,在光鏡下是灰藍色斑塊狀,稱為尼氏小體。樹突和軸突是神經元的突起,能在神經元之間傳遞電沖動,突起的大小和形態各不相同,很難用常規的顯微鏡鑒別。脊髓組織內含有大量膠質細胞,神經元含量少,分離純化難度大,且脊髓神經元細胞是高度分化的終末細胞,不能分裂增殖,培養要求高。剛接種的脊髓神經元呈圓形,體積小,透亮,無突起。培養2-3d,可見胞體增大,突起增多延長;培養6-7d,細胞體大飽滿,突起明顯增加延長并交織成網,光暈明顯,立體感強。培養20d后,死亡細胞明顯增加,細胞出現內空泡,突起粗細不均,甚至脫壁,發生細胞崩解。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠脊髓神經元采用膠原酶&聯合消化法、神經元專用培養基培養篩選結合化學試劑抑制法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠脊髓神經元經β-Tubulin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 神經元細胞樣
傳代特性 屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
豬胰島素樣生長因子1試劑盒 豬胰島素樣生長因子1試劑盒 規格型號:96T/48T 豬胰島素樣生長因子1試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:豬胰島素樣生長因子1試劑盒、豬胰島素樣生長因子1eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
豬胰島素試劑盒 豬胰島素試劑盒 規格型號:96T/48T 豬胰島素試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:豬胰島素試劑盒、豬胰島素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
豬氧化低密度脂蛋白試劑盒 豬氧化低密度脂蛋白試劑盒 規格型號:96T/48T 豬氧化低密度脂蛋白試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:豬氧化低密度脂蛋白試劑盒、豬氧化低密度脂蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
豬壞死因子α試劑盒 豬壞死因子α試劑盒 規格型號:96T/48T 豬壞死因子α試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:豬壞死因子α試劑盒、豬壞死因子αeisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
豬血管生成素2(ANG-2)ELISA 試劑盒
Human creatine kinase isoenzyme MB (CK-MB) ELISA Kit 人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)試劑盒
RabbitFibrinogen,FbgELISAKit 兔血纖蛋白原(Fbg)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforai-Q-Ab(Humanai-Qfeveraibody)ELISAKit人抗Q熱抗體
血液3-羥-3-甲戊二酰(HMG-COA)還原酶活性直接比色法定量試劑盒20次
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C4結合蛋白β(C4BPβ)重組蛋白 Recombinant C4 Binding Protein Beta (C4BPb)
LILRA3重組人 ILT6 / LILRA3 蛋白 Protein
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BLK Protein Human 重組人 BLK / B Lymphocyte Kinase 蛋白 (GST 標簽)
KYNU重組小鼠 KYNU / Kynureninase 蛋白 (His 標簽) Protein
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體液亮(leucine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
ELISAKitPAF牛血小板活化因子
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