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更新時間:2024-11-04
小鼠臍靜脈平滑肌細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
臍帶組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7670 |
細胞簡介:
小鼠臍靜脈平滑肌分離自臍帶組織;它是臍靜脈的重要結構組成細胞之一,在機體的正常生理過程中發揮著重要作用。臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結構,臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈,卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中,子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細血管,與胎盤的子體部胎兒毛細血管靠近,在此處母體和胎兒的血液間進行CO2和O2,代謝產物即代謝廢物和營養物質的交換。臍動脈將胎兒產生的廢物運送至胎盤,臍靜脈將O2和營養物質從胎盤運送給胎兒。血管平滑肌是許多重大血管疾病的細胞基礎;血管平滑肌細胞的異常增加的生長潛力在血管疾病發生過程中起決定作用。由于臍帶是分娩過程中的廢棄物,同時從臍帶中分離人臍靜脈平滑肌細胞方法相對成熟,使得體外培養的臍靜脈平滑肌細胞作為研究血管的模型細胞。臍靜脈平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠臍靜脈平滑肌采用膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠臍靜脈平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
小鼠中性粒細胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)試劑盒 96T/48T
小鼠中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)試劑盒 96T/48T
小鼠中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)試劑盒 96T/48T
小鼠脂聯素(ADP)試劑盒 96T/48T
小鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat apoptosis related factor (FAS/CD95) ELISA Kit 大鼠凋亡相關因子(FAS/CD95)試劑盒
Human1,3-βDglucosidaseELISAKit 人1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βDglucosidase)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitfor1,3-BetaD-Glu(Human1,3-BetaDglucosidase)ELISAKit人1,3-βD葡葡糖苷酶
飲料糖精(saccharin)含量比色法定量試劑盒20次
Mousekeyholelimpethemocyanin,KLHELISAKit小鼠鑰孔蟲戚血藍蛋白(KLH)試劑盒規格:96T/48T
MFSD6蛋白抗體
FGFR1癌基因伴侶蛋白2單克隆抗體
CTSS重組人 Cathepsin S / CTSS 蛋白 Protein
內臟脂肪特異性絲蛋白酶抑制因子(Vaspin)重組蛋白 Recombinant Visceral Adipose Tissue Derived Serine Protease Inhibitor (Vaspin)
PILRA重組人 PILR-alpha / PILRA 蛋白 Protein
CD244 Protein Human 重組人 2B4 / SLAMF / CD244 蛋白
HA Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Pigeon/Shanghai/S1069/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
內臟脂肪特異性絲蛋白酶抑制因子(Vaspin)重組蛋白 Recombinant Visceral Adipose Tissue Derived Serine Protease Inhibitor (Vaspin)
CD244 Protein Human 重組人 2B4 / SLAMF / CD244 蛋白
CTSS重組人 Cathepsin S / CTSS 蛋白 Protein
HA Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Pigeon/Shanghai/S1069/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
PILRA重組人 PILR-alpha / PILRA 蛋白 Protein
小鼠臍靜脈平滑肌細胞大鼠富亮酸α2糖蛋白1(LRG1)試劑盒 ,英文名: LRG1 ELISA Kit
Porcine hepatocyte growth factor (HGF) ELISA Kit 豬肝細胞生長因子(HGF)試劑盒
轉基因植物Sad1基因核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMBP/MBL(HumanMannmabindingprotein/mannanbindinglectin)ELISAKit人甘露糖結合蛋白/甘露糖結合凝集素
體液血管緊張素Ⅰ轉化酶2(ACE2)活性熒光共振能量轉移法(FRET)定量試劑盒20次
ELISAKitTGFβ2轉化生長因子β2
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