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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
小鼠氣管平滑肌細(xì)胞
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
小鼠氣管平滑肌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：M期磷蛋白10抗體 鋅指蛋白537抗體 TRIM72蛋白抗體 小鼠乳腺上皮細(xì)胞 大鼠胚胎肝母細(xì)胞 小鼠胚胎干細(xì)胞;ES-E14TG2a 人滋養(yǎng)細(xì)胞；HTR-8
產(chǎn)品型號(hào)：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷(xiāo)商
訪問(wèn)量：3363
更新時(shí)間：2024-11-04
產(chǎn)品特性Product characteristics
小鼠氣管平滑肌細(xì)胞
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
氣管 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7018 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠氣管平滑肌分離自氣管組織；氣管（Trachea），呼吸器官的一部分；為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣，與環(huán)狀軟骨相連；向下至第四、五胸椎體（相當(dāng)胸骨角平面）交界處，分左、右主支氣管，分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個(gè)半環(huán)狀軟骨構(gòu)成，有彈性，軟骨為“C"字形的軟骨環(huán)，缺口向后，各軟骨環(huán)以韌帶連接起來(lái)，環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接，保持了持續(xù)張開(kāi)狀態(tài)。管腔襯以粘膜，表面覆蓋纖毛上皮，粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒，纖毛不斷向咽部擺動(dòng)將粘液與灰塵排出，以凈化吸入的氣體。氣管平滑肌是氣管的重要結(jié)構(gòu)組成之一，在機(jī)體的正常生理過(guò)程中發(fā)揮著重要作用；能夠保持氣道張力，維持氣道管狀形態(tài)，從而有利于氣體流通，保持肺部通氣。氣管平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng)，高低起伏；細(xì)胞密度低時(shí)，常交織成網(wǎng)狀；密度高時(shí)，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。氣管平滑肌細(xì)胞的異常是呼吸道疾病的重要病理特征之一，其增生、肥大是氣道重塑的關(guān)鍵。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠氣管平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合組織貼塊法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠氣管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
札如病毒(SV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T
人星狀病毒(HastV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T
肉毒桿菌(A/B型)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T
肉毒桿菌(E/F型)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T
植物鈣調(diào)0酸酶(CaN)試劑盒
Human ai perinuclear factor (APF) ELISA Kit 人抗核周因子抗體(APF)試劑盒
Porcinetumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKit 豬壞死因子α(TNF-α)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforADV-IgG(HumanAdenovirusIgG)ELISAKit人腺病毒IgG
血液樣品固著液(Aceticalcohol固著液)50毫升
MouseSomatostatin,SSELISAKit小鼠(SS)試劑盒
MRVI1蛋白抗體
FITC標(biāo)記人CD41單克隆抗體
HA重組甲型流感 H12N5 (A/green-winged teal/ALB/199/1991) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
RRAD (Ras-related associated with diabetes 0.5mgRRAD (Ras-related associated with diabetes ) RRAD(多肽抗原)
MMP8重組人 MMP8 / CLG1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ACOT13 Protein Human 重組人 THEM2 / ACOT13 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IGF1R Protein Human 重組人 IGF1R / CD221 蛋白 (His 標(biāo)簽)
RRAD (Ras-related associated with diabetes 0.5mgRRAD (Ras-related associated with diabetes ) RRAD(多肽抗原)
ACOT13 Protein Human 重組人 THEM2 / ACOT13 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA重組甲型流感 H12N5 (A/green-winged teal/ALB/199/1991) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
IGF1R Protein Human 重組人 IGF1R / CD221 蛋白 (His 標(biāo)簽)
MMP8重組人 MMP8 / CLG1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
小鼠氣管平滑肌細(xì)胞大鼠復(fù)制蛋白A1(RPA1)試劑盒 ，英文名： RPA1 ELISA Kit
Rat beta amyloid (A beta 1-42 1-42) ELISA Kit 大鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)試劑盒
RatVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISAKit 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforDsg-1(Humandesmogleins1)ELISAKit人橋粒芯糖蛋白-1
細(xì)胞培養(yǎng)液氧化應(yīng)激活性氧(ROS)比色法定量試劑盒(超氧陰離子)100次
RatHistamine,HISELISAKit大鼠組胺(HIS)試劑盒
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂浮；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行
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