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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
小鼠腦動脈血管平滑肌細(xì)胞
產(chǎn)品簡介：
小鼠腦動脈血管平滑肌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：MKLN1抗體 廣泛控制氨基酸合成1樣蛋白1抗體 TRAP100蛋白抗體 小鼠膀胱平滑肌細(xì)胞 大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞 MDCK狗腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞 A549+luc 人肺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記
產(chǎn)品型號：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：132
更新時間：2024-11-04
產(chǎn)品特性Product characteristics
小鼠腦動脈血管平滑肌細(xì)胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
腦動脈組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7336 |
細(xì)胞簡介：
小鼠腦動脈血管平滑肌分離自腦動脈組織；腦動脈有成對的頸內(nèi)動脈和椎動脈互相銜接成動脈循環(huán)；靜脈系多不與同名動脈拌行，所收集的靜脈血優(yōu)良入靜脈竇再匯入頸內(nèi)靜脈；各級靜脈都沒有瓣膜。它包括腦的動脈系統(tǒng)和腦的靜脈系統(tǒng)。腦動脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細(xì)胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠腦動脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的小鼠腦動脈血管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
中文名稱 方法 規(guī)格
小鼠多巴胺(DA)ELISAKit ELISA.
小鼠高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)ELISAKit ELISA.
小鼠高敏甲狀腺素(u-T4)ELISAKit ELISA.
豬補(bǔ)體片段3b受體(C3bR)ELISA 試劑盒
Human Legionella aibody IgM (LP Ab-IgM) ELISA Kit 人軍團(tuán)菌抗體IgM(LP Ab-IgM )試劑盒
PorcineGlucoseanspoer2,GL2ELISAKit 豬葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(GL2)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforALK(Humananapasticlymphomakinase)ELISAKit人間變性淋巴瘤激酶
血液卵0脂乙酰轉(zhuǎn)移酶(LCAT)活性熒光定量試劑盒20次
MousevonWillebrandFactor,vWFELISAKit小鼠血管性血友病因子/瑞斯托輔因子(vWF)試劑盒
FITC標(biāo)記人CD123單克隆抗體
ATP酶H+轉(zhuǎn)運(yùn)溶酶體輔助蛋白2抗體
IL13重組小鼠 IL13 / ALRH 蛋白 Protein
二氫轉(zhuǎn)乙酰基酶(DLAT)重組蛋白 Recombinant Dihydrolipoyl Transacetylase (DLAT)
NRN1L重組人 NRN1L / neuritin 1-like / Cpg15-2 蛋白 Protein
ALDH1A3 Protein Human 重組人 ALDH1A3 / RALDH3 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CD38 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 SCARB3 蛋白
肌肌酸激酶(CKM)天然蛋白 Native Creatine Kinase, Muscle (CKM)
ALDH1A3 Protein Human 重組人 ALDH1A3 / RALDH3 蛋白 (His 標(biāo)簽)
PDGFC重組小鼠 PDGF-C / SCDGF 蛋白 Protein
TEK Protein Rat 重組大鼠 Tie2 / TEK 蛋白
SLITRK6重組人 SLITRK6 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
小鼠腦動脈血管平滑肌細(xì)胞大鼠肝配蛋白B受體3(EPHB3)試劑盒 ，英文名： EPHB3 ELISA Kit
Rat alpha L fucosidase (AFU) ELISA Kit 大鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)試劑盒
RatClusterofdiffereiation30,CD30ELISAKit 大鼠白細(xì)胞分化抗原30(CD30)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforE2ELISAKIT魚雌二醇
細(xì)胞培養(yǎng)污染性支原體M.hominis鑒定16SrDNAPCR擴(kuò)增試劑盒20次
Ratinducibleniicoxidesyhase,iNOSELISAKit大鼠誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)試劑盒
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂浮；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行
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