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更新時間:2024-11-04
小鼠口腔上皮細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
口腔黏膜組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7675 |
細胞簡介:
小鼠口腔上皮分離自口腔黏膜組織;口腔上皮細胞是一種上皮細胞,呈扁平、多邊形,形狀不規則。口腔各壁都有黏膜覆蓋,口腔上皮細胞主要分布在口腔兩側頰部。上皮的垂直切面上,細胞形狀不一。緊靠基膜的一層基底細胞為矮柱狀,為具有增殖分化能力的干細胞,部分子細胞向淺層移動。基底層以上是數層多邊形細胞,再上為幾層梭形或扁平細胞。僅靠近表面幾層細胞為扁平狀,基底層細胞能不斷分裂增生,以補充表層衰老或損傷脫落的細胞。復層扁平上皮深層的結締組織內有豐富的毛細血管,有利于復層扁平上皮的營養。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠口腔上皮細胞先消化、后-膠原酶混合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠口腔上皮經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
豬血小板衍生生長因子(PDGF)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬血小板活化因子(PAF)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬血纖蛋白原降解產物(FDP)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬血纖蛋白原(Fbg)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬血管內皮鈣粘著蛋白復合體(VE-cad)ELISA 試劑盒
Human maix Gla protein (MGP) ELISA Kit 人基質γ羧基谷蛋白(MGP)試劑盒
RabbitsolubleFactor-relatedApoptosis,sFAS/Apo-1ELISAKit 兔可溶性凋亡相關因子(sFAS/Apo-1)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforai-HDV(Humanai-hepatitisDvirusaibody)ELISAKit人抗丁型肝病毒抗體
血液D-葡萄糖氧化法定量試劑盒20次
PorcineHyaluronicacid,HAELISAKit豬透明質酸(HA)試劑盒
CD32B重組兔單克隆抗體
21號染色體開放閱讀框63抗體
SCARB2重組人 LIMP-2 / SCARB2 / CD36L2 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
胰島素樣生長因子結合蛋白1(IGFBP1)重組蛋白 Recombinant Insulin Like Growth Factor Binding Protein 1 (IGFBP1)
HA重組甲型流感 H1N1 (A/New Caledonia/20/1999) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽) Protein
BIRC2 Protein Human 重組人 cIAP1 / HIAP2 蛋白 (AVI 標簽)
SSPA Protein E. coli 重組大腸桿菌 ssPA / Stringent starvation protein A 蛋白 (His 標簽)
胰島素樣生長因子結合蛋白1(IGFBP1)重組蛋白 Recombinant Insulin Like Growth Factor Binding Protein 1 (IGFBP1)
BIRC2 Protein Human 重組人 cIAP1 / HIAP2 蛋白 (AVI 標簽)
SCARB2重組人 LIMP-2 / SCARB2 / CD36L2 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
SSPA Protein E. coli 重組大腸桿菌 ssPA / Stringent starvation protein A 蛋白 (His 標簽)
HA重組甲型流感 H1N1 (A/New Caledonia/20/1999) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽) Protein
小鼠口腔上皮細胞大鼠高密度脂蛋白(HDL)試劑盒 ,英文名: HDL ELISA Kit
Rabbit leoopic hormone (LH) ELISA Kit 兔子促黃體激素(LH)試劑盒
腸道腺病毒(EADV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMHB(HumanMethemoglobin)ELISAKit人高鐵血紅蛋白
體液牛病毒性腹瀉病毒(BovineViralDiarrhoeaVirus;BVDV)定量PCR擴增試劑盒20次
ELISAKitPFK牛0酸果糖激酶
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