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更新時間:2024-11-04
小鼠虹膜色素上皮細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
眼球 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7380 |
細胞簡介:
小鼠虹膜色素上皮分離自眼球虹膜組織;虹膜是眼睛構造的一部分,屬于眼球中層,位于血管膜的最前部;在睫狀體前方虹膜,中心有一圓形開口,稱為瞳孔,猶如相機當中可調整大小的光圈,內含色素決定眼睛的顏色。日間光線較為強烈時,虹膜會收蹜,只使一小束光線穿透瞳孔,進入眼睛;當進入黑暗環境中,虹膜就會往后退縮,使瞳孔變大,讓更多的光線進入眼睛,多數的脊椎動物的眼睛都有虹膜。虹膜色素上皮細胞(IPE)是虹膜重要結構組成細胞之一,位于虹膜組織的后面,和視網膜色素上皮細胞(RPE)同樣起源于神經外胚葉層,可能具有相似的生物學功能,因此對IPE的研究將為防治因RPE結構或功能異常而導致的眼底病提供新思路。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠虹膜色素上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠虹膜色素上皮經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
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器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
豬總蛋白(TPS)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬轉化生長因子β1(TGF-β1)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHCⅢ/SLAⅢ)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHCⅡ/SLAⅡ)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA 試劑盒
Human activated Hageman factor (F XII a) ELISA Kit 人活化Ⅻ(FⅫa)試劑盒
RabbitapoproteinB100,apo-B100ELISAKit 兔載脂蛋白B100(apo-B100)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforANX-VELISAKit大鼠膜聯蛋白Ⅴ
血小板活化因子乙酰水解酶(PAFAH)活性比色法定量試劑盒20次
PorcineIerleukin1receptoraagonist,IL-1raELISAKit豬白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)試劑盒
4號染色體開放閱讀框44抗體
腫瘤抑制基因野生型P53單克隆抗體
MBL1重組大鼠 MBL1 蛋白 Protein
DYKDDDDK Tag(CT 0.5mgDYKDDDDK Tag(CT)/Flag-Tag 標簽DYKDDDDK Tag分支肽
GOLM1重組人 GOLM1 / GP73 蛋白 (His 標簽) Protein
BMPR1B Protein Human 重組人 BMPR1B / ALK-6 (149-502) 蛋白 (His & GST 標簽)
THSD1 Protein Mouse 重組小鼠 THSD1 / TMTSP 蛋白 (His 標簽)
DYKDDDDK Tag(CT 0.5mgDYKDDDDK Tag(CT)/Flag-Tag 標簽DYKDDDDK Tag分支肽
BMPR1B Protein Human 重組人 BMPR1B / ALK-6 (149-502) 蛋白 (His & GST 標簽)
MBL1重組大鼠 MBL1 蛋白 Protein
THSD1 Protein Mouse 重組小鼠 THSD1 / TMTSP 蛋白 (His 標簽)
GOLM1重組人 GOLM1 / GP73 蛋白 (His 標簽) Protein
小鼠虹膜色素上皮細胞大鼠骨保護素(OPG)試劑盒 ,英文名: OPG ELISA Kit
Rabbit ierleukin 2 (IL-2) ELISA Kit 兔子白介素2(IL-2)試劑盒
人細小病毒(B19)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMIP-3Beta/ELC/CCL19(Mousemacrophageinflammatoryprotein3Beta)ELISAKit小鼠巨噬細胞性蛋白3β
體液結構型神經元合成酶(cNOS/NOS1/nNOS)活性比色法定量試劑盒20次
ELISAKitIL-6犬白介素6