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更新時間:2024-11-04
兔椎間盤纖維環細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
椎間盤組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7132 |
細胞簡介:
兔椎間盤纖維環分離自椎間盤組織;椎間盤是位于脊柱兩椎體之間,由軟骨板、纖維環、髓核組成的一個密封體。上下有軟骨板,是透明軟骨復蓋于椎體上,下面骺環中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環一起將髓核密封起來。纖維環由膠原纖維束的纖維軟骨構成,位于髓核的四周。纖維環的纖維束相互斜行交叉重疊,使纖維環成為堅實的組織,能承受較大的彎曲和扭轉負荷。纖維環的前側及兩側較厚,而后側較薄。纖維環的前部有強大的前縱韌帶,后側的后縱韌帶較窄、較薄。纖維環細胞密度為9000個細胞/mm3,其外層的細胞呈梭型,主要屬于纖維細胞,內層細胞呈圓形,主要屬于軟骨細胞。在培養的情況下,用透射電鏡觀察則有許多共同的超微結構表現,它們的核較圓,核仁較明顯。細胞質內可見大量的附有核糖體顆粒的粗面內質網和滑面內質網。細胞質內線粒體多,為橢圓形,有的可看到雙層單位膜,由單位膜包繞初級深酶體和次級深酶體。細胞質內有一系列的扁平囊及小泡主成的高爾基復合體和分泌顆粒,纖維環細胞合成分泌蛋白多糖及膠原纖維的能力很旺盛,保證纖維環生理代謝活動所需的構造物質的供給。一但這種供給減少,纖維環的生物性能就會減弱,椎間盤開始退變。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的兔椎間盤纖維環采用膠原酶-聯合消化法并結合軟骨細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的兔椎間盤纖維環經Ⅰ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態優良
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
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器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
豬免疫球蛋白E(IgE)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬免疫球蛋白A(IgA)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬流行性腹瀉病毒抗體(PEDV)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬0酸化細胞外信號調節激酶(pERK)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬內皮型合酶(eNOS)試劑盒
Human thyroid peroxidase (TPO) ELISA Kit 人甲狀腺過氧化物酶(TPO)試劑盒
GuineapigTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKit 豚鼠壞死因子α(TNF-α)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAmylin(MouseAmylin)ELISAKit小鼠胰淀素
血液S轉移酶(GSHST)總活酶動力性比色法定量試劑盒20次
PorcineB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISAKit豬B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)試劑盒
FITC標記人CD11c單克隆抗體
酸性線粒體肌酸激酶抗體
CLEC4F重組大鼠 CLEC4F / CLECSF13 蛋白 Protein
Dynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 0.5mgDynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 ) 鳥苷三0酸酶-發動蛋白2抗體
BLNK重組人 BLNK / Ly-57 / SLP-65 蛋白 (His 標簽) Protein
ASGR1 Protein Human 重組人 ASGPR1 / ASGR1 蛋白 (His 標簽)
TIMP1 Protein Mouse 重組小鼠 TIMP1 / TIMP / CLGI 蛋白
Dynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 0.5mgDynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 ) 鳥苷三0酸酶-發動蛋白2抗體
ASGR1 Protein Human 重組人 ASGPR1 / ASGR1 蛋白 (His 標簽)
CLEC4F重組大鼠 CLEC4F / CLECSF13 蛋白 Protein
TIMP1 Protein Mouse 重組小鼠 TIMP1 / TIMP / CLGI 蛋白
BLNK重組人 BLNK / Ly-57 / SLP-65 蛋白 (His 標簽) Protein
兔椎間盤纖維環細胞大鼠活化素A受體抗體IgM(ACV-RAb IgM)試劑盒 ,英文名: ACV-RAb IgM ELISA Kit
Rabbit pyridinium crosslinks (PY) ELISA Kit 兔交聯物(PY)試劑盒
桿菌(BA)核酸試劑盒 48T
CLIAKitforMousepituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide,PACAPELISAKit小鼠垂體腺苷酸環化酶激活肽
體液元素熒光定量試劑盒20次
ELISAKitPⅢNP人Ⅲ型前膠原肽