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更新時間:2024-11-04
兔羊膜上皮細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
胎盤組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7171 |
細胞簡介:
兔羊膜上皮分離自胎盤組織;胎盤(placenta)是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內膜聯合長成的母子間交換物質的過渡性器官,由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構成。胎兒在子宮中發育,依靠胎盤從母體取得營養,而雙方保持相當的獨立性。胎盤還產生多種維持妊娠的激素,是一個重要的內分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,胚胎生長出一些輔助結構如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結合,以達到母子間物質的交換,這樣的結構稱假胎盤。羊膜是胎盤的最內層,與眼結膜組織結構相似,含有眼表上皮細胞,包括結膜細胞和角膜上皮細胞生長所需要的物質,其光滑,無血管、神經及淋巴,具有一定的彈性;在電鏡下,其分為五層:上皮層、基底膜、致密層、纖維母細胞層和海綿層,羊膜基底膜和羊膜羊膜基質層含有大量不同的膠元,主要為Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份。羊膜細胞主要由羊膜上皮細胞和羊膜間充質細胞組成,均具有多分化潛能,可轉化為神經元,且還有合成、釋放生物活性物質和神經營養因子的功能。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的兔羊膜上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的兔羊膜上皮經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
豬補體蛋白3試劑盒 豬補體蛋白3試劑盒 規格型號:96T/48T 豬補體蛋白3試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:豬補體蛋白3試劑盒、豬補體蛋白3eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
豬表皮生長因子試劑盒 豬表皮生長因子試劑盒 規格型號:96T/48T 豬表皮生長因子試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:豬表皮生長因子試劑盒、豬表皮生長因子eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
豬白血病抑制因子受體試劑盒 豬白血病抑制因子受體試劑盒 規格型號:96T/48T 豬白血病抑制因子受體試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:豬白血病抑制因子受體試劑盒、豬白血病抑制因子受體eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
豬白細胞介素15試劑盒 豬白細胞介素15試劑盒 規格型號:96T/48T 豬白細胞介素15試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:豬白細胞介素15試劑盒、豬白細胞介素15eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
豬骨鈣素/骨谷酸蛋白(OT/OCN/BGP)ELISA 試劑盒
Human connective tissue growth factor (CTGF) ELISA Kit 人結締組織生長因子(CTGF)試劑盒
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血液精(arginine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
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GABABR2/GB2(GABA B Receptor 2 0.5mgGABABR2/GB2(GABA B Receptor 2) γ1氨基A型受體B2抗原
FLRT1重組人 FLRT1 蛋白 (His 標簽) Protein
ANGPTL4 Protein Human 重組人 ANGPTL4 蛋白
LY9 Protein Mouse 重組小鼠 LY9 / CD229 / SLAMF3 蛋白 (His 標簽)
GABABR2/GB2(GABA B Receptor 2 0.5mgGABABR2/GB2(GABA B Receptor 2) γ1氨基A型受體B2抗原
ANGPTL4 Protein Human 重組人 ANGPTL4 蛋白
HEPACAM2重組大鼠 HepaCAM2 蛋白 (His 標簽) Protein
LY9 Protein Mouse 重組小鼠 LY9 / CD229 / SLAMF3 蛋白 (His 標簽)
FLRT1重組人 FLRT1 蛋白 (His 標簽) Protein
兔羊膜上皮細胞大鼠肌紅蛋白(MYO)試劑盒 ,英文名: MYO ELISA Kit
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RatCathepsinK,cath-KELISAKit 大鼠組織蛋白酶K(cath-K)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforET3游離三甲狀腺原T3
細胞賴羥化酶(lysylhydroxylase)活性比色法定量試劑盒20次
Ratmaixmetalloproteinase13,MMP-13ELISAKit大鼠基質金屬蛋白酶13(MMP-13)試劑盒