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更新時間:2024-11-04
兔胸腺上皮細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
胸腺 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X8100 |
細胞簡介:
兔胸腺上皮分離自胸腺組織;胸腺是機體重要的淋巴器官,其功能與免疫緊密相關,是T細胞分化、發育、成熟的場所,還可以分泌胸腺激素及激素類物質,具有內分泌技能的器官。胸腺上皮細胞和胸腺細胞是胸腺微環境的重要組成部分,其外,胸腺上皮細胞組成了胸腺細胞不同發育階段的三維結構,根據其在胸腺中位置不同,可分為皮質胸腺上皮細胞和髓質胸腺上皮細胞。胸腺細胞的發育和成熟是通過在胸腺皮質和髓質上皮細胞的遷移過程中相互作用完成的。此外,胸腺細胞通過皮質胸腺上皮細胞介導的陽性選擇和髓質胸腺上皮細胞介導的陰性選擇發育為能夠識別和耐受自身主要組織相容復合體和自身抗原的成熟T淋巴細胞。胸腺上皮細胞是構成胸腺微環境的主要成份,其形態、分布和功能多樣。表面抗原表達具有高度異質性,與胸腺細胞結合成不同類型復合體,部分胸腺上皮細胞相互排列構成囊泡樣結構。電鏡觀察,可把胸腺上皮細胞分為3-6型,用抗胸腺上皮細胞單克隆抗體熒光染色可把胸腺上皮細胞分為9種類型。
方法簡介:
實驗室分離的兔胸腺上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的兔胸腺上皮經PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:上皮細胞樣
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔胸腺上皮體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的優良培養狀態。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
小鼠α羥基脫氫酶(αHBDH)試劑盒 96T/48T
小鼠α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)試劑盒 96T/48T
小鼠αS轉移酶(α-GST)試劑盒 96T/48T
小鼠α甘露糖苷酶(αManase)試劑盒 96T/48T
小鼠漢坦病毒(HV)試劑盒 96T/48T
Adrenaline (EPI) ELISA Kit 人(EPI)試劑盒
humanEndothelin1,ET-1ELISAKit 人內皮素1(ET-1)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-parainfluenzavirusIgMaibody,ai-PIVIgM試劑盒人抗副流感病毒IgM抗體(ai-PIVIgM)試劑盒規格:96T/48T
植物細胞壁鈣熒光白(Calcofluorwhite;CFW)熒光染色試劑盒20次
Humayrosinekinasewithimmunoglobulin-likeandEGF-likedomains2,Tie-2ELISAKit人血管生成素受體/含免疫球蛋白樣環和上皮生長因子樣域酪激酶2(Tie-2)試劑盒規格:96T/48T
B淋巴細胞白血病前體蛋白轉錄因子4抗體
三磷酸腺苷受體受體P2X3抗體
VTCN1重組小鼠 B7-H4 / B7S1 / B7x 蛋白 (Fc 標簽) Protein
白介素8受體α(IL8Rα)重組蛋白 Recombinant Interleukin 8 Receptor Alpha (IL8Ra)
IL1R2重組人 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白 Protein
FABP2 Protein Human 重組人 FABP2 / I-FABP 蛋白
PDCD1LG2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白
白介素8受體α(IL8Rα)重組蛋白 Recombinant Interleukin 8 Receptor Alpha (IL8Ra)
FABP2 Protein Human 重組人 FABP2 / I-FABP 蛋白
VTCN1重組小鼠 B7-H4 / B7S1 / B7x 蛋白 (Fc 標簽) Protein
PDCD1LG2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白
IL1R2重組人 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白 Protein
兔胸腺上皮細胞大鼠基質金屬蛋白酶16(MMP16)試劑盒 ,英文名: MMP16 ELISA Kit
Mouse histone H2b (histon-H2b) ELISA Kit 小鼠組蛋白H2b(histon-H2b)試劑盒
Ratypsinogenactivationpeptide,TAPELISAKit 大鼠原激活肽(TAP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforF1+2(Humanprothrombinfragme1+2)ELISAkit人原片段F1+2
細胞結構型內皮細胞合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性比色法定量試劑盒20次
Ratmyelinbasicprotein,MBPELISAKit大鼠髓0脂堿性蛋白(MBP)試劑盒規格:96T/48T
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
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