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更新時間:2024-11-04
兔臍帶間充質干細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
臍帶組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7167 |
細胞簡介:
兔臍帶間充質干分離自臍帶;臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結構。原來是由羊膜包卷著卵黃囊和尿膜的柄狀伸長部而形成的。臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈,卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈。當卵黃囊及其血管退化,臍動脈和臍靜脈就發達起來,在這些間隙中可以看到疏松的膠狀的間充質。在子宮中,子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細血管,與胎盤的子體部胎兒毛細血管靠近,在此處母體和胎兒的血液間進行CO2和O2,代謝產物即代謝廢物和營養物質的交換。臍動脈將胎兒來的廢物運送至胎盤,臍靜脈將O2和營養物質從胎盤運送給胎兒。最后由子宮靜脈將來自胎兒的代謝廢物運走,某種激素和抗體等也通過臍帶從母體移交給胎兒。臍帶中含有大量的干細胞,干細胞是生命的種子,它會分化成機體的各種細胞,結出各種不同的果實——血液細胞、神經細胞、骨骼細胞等。干細胞是具有自我更新、高度增殖和多項分化潛能的細胞群體;這些細胞可以通過分裂維持自身細胞的特性和數量,又可進一步分化為各種組織細胞,從而在組織修復等方面發揮積極作用。間充質干細胞(MSC)是一種具有高度自我更新和多向分化潛能的干細胞。在不同的誘導條件下,可分化為多種造血細胞以外的組織細胞,并具有造血支持、免疫調節、組織修復等作用;目前,多用于風濕免疫疾病的治療。間充質干細胞(MSCs)是一種具有自我更新和多向分化潛能的成體干細胞,存在于骨髓、脂肪組織、臍血及多種胎兒組織。它可分泌多種細胞因子及生長因子,促進造血干細胞(HSC)的增殖與分化。MSCs還具有免疫調節、抗炎和組織修復作用,可減輕移植物抗宿主病(GVHD)及其他移植相關并發癥。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的兔臍帶間充質干采用組織貼塊法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的兔臍帶間充質干經CD90免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3-5代左右
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
嗜酸性粒細胞趨化因子 (Eotaxin) 作用: ELISA 規格: 96T 美國 Biosource
Human Eotaxin-2/MPIF-2/CCL24 作用: ELISA 規格: 96T 美國 R&D
Human Eotaxin-3/CCL26 作用: ELISA 規格: 96T 美國 R&D
促紅細胞生成素 (EPO) 作用: ELISA 規格: 96T 德國 DRG
豚鼠血清(NO)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat signal ansduction molecule 1 (Smad1) ELISA Kit 大鼠信號轉導分子1(Smad1)試劑盒
Humanendomorphin-2,EM-2ELISAKit 人內肽-2(EM-2)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCryoglobulin,CG試劑盒人冷球蛋白(CG)試劑盒規格:96T/48T
組織D-乳酸比色法定量試劑盒20次
humanProstaglandinD2-methoxime,PGD2-MOXELISAKit人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)試劑盒規格:96T/48T
巴胺受體D2抗體
磷酸烯醇丙酮酸羧激酶抗體
S100B重組小鼠 S100B / S100beta 蛋白 (Fc 標簽) Protein
端粒酶關聯蛋白1(TEP1)重組蛋白 Recombinant Telomerase Associated Protein 1 (TEP1)
DDR2重組人 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白 Protein
IGJ Protein Human 重組人 IGJ / Immunoglobulin J chain 蛋白
IL17RA Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL17RA / IL17R 蛋白 (Fc 標簽)
白蛋白(ALB)天然蛋白 Native Albumin (ALB)
IGJ Protein Human 重組人 IGJ / Immunoglobulin J chain 蛋白
TCN2重組小鼠 TCN2 / Transcobalamin-II 蛋白 Protein
IFNA1 Protein Rat 重組大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 蛋白 (Fc 標簽)
B3GNT2重組人 B3GNT2 蛋白 (Fc 標簽) Protein
兔臍帶間充質干細胞大鼠抗酸性0酸酶(ACP5)試劑盒 ,英文名: ACP5 ELISA Kit
Monkey glial fibrillary acidic protein (GFAP) ELISA Kit神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)試劑盒
RaeninELISAKit 大鼠腎素(Renin)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforFree-T3(MouseFreei-iodothyronineIndes)ELISAKit小鼠游離三甲狀腺原
細胞活化10(FACTORXa)活性比色法定量試劑盒20次
Ratplaceagrowthfactor,PLGFELISAKit大鼠胎盤生長因子(PLGF)試劑盒規格:96T/48T