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更新時間:2024-10-30
人腎動脈內皮細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
腎組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 內皮細胞樣 | YS-01X7259 |
細胞簡介:
人腎動脈內皮分離自腎組織;腎臟是機體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內代謝產物及某些廢物、毒物,同時經重吸收功能保留水份及其他有用物質,如葡萄糖、蛋白質、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等,以調節水、電解質平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內分泌功能,生成腎素、促紅細胞生成素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等,又為機體部分內分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機體內環境的穩定,使新陳代謝得以正常進行。腎動脈的分支為葉間動脈,穿行于腎柱內,上行至皮質與髓質交界處,形成與腎表面平行的弓狀動脈。小葉間動脈向被膜發出毛細血管,并向周圍的腎小體發出入球小動脈,進入腎小囊后形成球形的毛細血管網,再匯集成出球小動脈,出腎小體。直小動脈分支形成毛細血管網,再匯合成直小靜脈,入弓狀靜脈、葉間靜脈,最后匯合成腎靜脈經腎門出腎,注入下腔靜脈。腎動脈既是腎的營養血管,又是腎的機能血管,與腎泌尿機能密切相關。腎動脈在腎實質內形成兩個毛細血管網:腎小球毛細血管網,血壓較高,利于血漿濾過形成原尿;球后毛細血管網,血壓較低,利于腎小管的重吸收。腎動脈內皮細胞是腎動脈的重要結構細胞之一,在機體的正常生理過程中發揮著重要作用。腎動脈內皮細胞主要功能有:①在血漿濾過形成原尿的過程中起重要作用,②在腎小管的重吸收過程中起重要作用,③保持凝血和纖溶的動態平衡。
方法簡介:
公司實驗室分離的人腎動脈內皮采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的人腎動脈內皮經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 內皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISAKit ELISA.
小鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISAKit ELISA.
小鼠交聯物(PY)ELISAKit ELISA.
小鼠骨橋素(OPN)ELISAKit ELISA.
小鼠干細胞因子受體(SCFR)ELISA 試劑盒
Human aquaporin 1 (AQP-1) ELISA Kit 人水通道蛋白1(AQP-1)試劑盒
HumancoagulationfactorⅧrelatedaigen,FⅧ-AgELISAKit 人Ⅷ相關抗原(Ⅷ-Ag)試劑盒 進口分裝
Humanapelin12,AP12試劑盒人apelin12(AP12)ELISAKi
植物氧化應激活性氧(ROS)魯米諾化學發光法定量試劑盒50次
HumaotalproteinS,TPSELISAKit人總蛋白S(TPS)試劑盒
胰島細胞自身抗原相關蛋白PTPRN2抗體
PE標記小鼠CD154單克隆抗體
FCGR2重組小鼠 CD32 / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標簽), Biotinylated Protein
ADAMTS7 peptide/HRP 辣根過氧化物酶標記整合素樣金屬蛋白酶與1型-7抗原 1mgADAMTS7 peptide/HRP 辣根過氧化物酶標記整合素樣金屬蛋白酶與1型-7抗原
TFAP2C重組人 TFAP2C / AP2-GAMMA 蛋白 (His 標簽) Protein
FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His & AVI 標簽)
CD14 Protein Rat 重組大鼠 CD14 蛋白
次0酸核糖基轉移酶1(HPRT1)重組蛋白 Recombinant Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase 1 (HPRT1)
FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His & AVI 標簽)
S100A9重組小鼠 S100A9 / CAGB / p14 蛋白 (His 標簽) Protein
IFNAR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白 (His 標簽)
ALOX15B重組人 ALOX15B / 15 Lipoxygenase 2 蛋白 Protein
人腎動脈內皮細胞大鼠髓鞘關聯糖蛋白(MAG)試劑盒 ,英文名: MAG ELISA Kit
Mouse glycogen phosphorylase II (GP-II) ELISA Kit 小鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)試劑盒
raesistinELISAKit 大鼠抵抗素(Resistin)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforHIT(Humanheparinassociatedaibody)ELISAKit人抗肝素PF4復合物抗體/HIT抗體
細胞RCT激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKit5-大鼠5核苷酸酶
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。