服務熱線
021-59989018
產品簡介:
產品型號:
廠商性質:經銷商
訪問量:139
更新時間:2024-10-30
人臍動脈平滑肌細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
臍帶組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7299 |
細胞簡介:
人臍動脈平滑肌分離自臍帶組織;它是臍動脈的重要結構組成細胞之一,在機體的正常生理過程中發揮著重要作用。臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結構,臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈,卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中,子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細血管,與胎盤的子體部胎兒毛細血管靠近,在此處母體和胎兒的血液間進行CO2和O2,代謝產物即代謝廢物和營養物質的交換。臍動脈將胎兒產生的廢物運送至胎盤,臍靜脈將O2和營養物質從胎盤運送給胎兒。由于臍帶是分娩過程中的廢棄物,同時從臍帶中分離臍靜動平滑肌細胞方法相對成熟,使得體外培養的臍動脈平滑肌細胞作為研究血管的模型細胞。臍動脈平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的人臍動脈平滑肌采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的人臍動脈平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態最佳
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
C(VC)檢測 Vitamin B2 (VB2) detection
B1(VB1)檢測 The total amino acid (TAA) detection
B2(VB2)檢測 Detection of malic dehydrogenase
總基酸(T-AA)檢測 Hydroxyproline sample preeatme
小鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA 試劑盒
Rat thrombin aithrombin complex (TAT) ELISA Kit 大鼠抗復合物(TAT)試劑盒
HumanBigEndothelin,BigETELISAKit 人大內皮素(BigET)試劑盒 進口分裝
HumanATP-bindingcassetteanspoerG2,ABCG2試劑盒人腺苷三0酸結合盒轉運體G2(ABCG2)試劑盒
植物源性食品腰果(cashew)試劑盒20次
HumahromboxaneA2,TX-A2ELISAKit人血栓素A2(TX-A2)試劑盒
腺苷酸活化蛋白激酶γ1抗體
G蛋白調節誘導神經突增生蛋白1抗體
AGRP重組小鼠 AGRP / AgRP 蛋白 (His 標簽) Protein
Adropin蛋白(AD)重組蛋白 Recombinant Adropin (AD)
CCDC47重組人 CCDC47 蛋白 (His 標簽) Protein
FGF21 Protein Human 重組人 FGF21 蛋白 (His 標簽)
TNF Protein Rat 重組大鼠 TNF-alpha / TNFA 蛋白
Adropin蛋白(AD)重組蛋白 Recombinant Adropin (AD)
FGF21 Protein Human 重組人 FGF21 蛋白 (His 標簽)
AGRP重組小鼠 AGRP / AgRP 蛋白 (His 標簽) Protein
TNF Protein Rat 重組大鼠 TNF-alpha / TNFA 蛋白
CCDC47重組人 CCDC47 蛋白 (His 標簽) Protein
人臍動脈平滑肌細胞大鼠無翅型MMTV整合位點家族成員5A(W5A)試劑盒 ,英文名: W5A ELISA Kit
Mouse eosinophil chemotactic protein Eotaxin 1 (Eotaxin 1/CCL11) ELISA Kit 小鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)試劑盒
MouseCXC-chemokinereceptor3,CXCR3ELISAKit 小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforHSP-20ELISAKit大鼠熱休克蛋白20
細胞MSK1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitIL-12/P40大鼠白介素12