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廠商性質:經銷商
訪問量:135
更新時間:2024-10-30
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業應用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
產品名稱:人角膜成纖維細胞
組織來源:眼角膜組織
產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態最佳
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞簡介:
人角膜成纖維分離自眼角膜組織;角膜位于眼球前壁的一層透明膜,約占纖維膜的前1/6,從后面看角膜呈正圓形,從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同,中央部最薄。角膜有十分敏感的神經末梢,如有外物接觸角膜,眼瞼便會不由自主地合上以保護眼睛。為了保持透明,角膜并沒有血管,透過外界空氣、淚液及房水獲取養份及氧氣。角膜分為五層,由前向后依次為:上皮細胞層、前彈力層、基質層、后彈力層、內皮細胞層。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的角膜成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。角膜成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括:構造和維持角膜的正常形態,合成和釋放細胞外基質以及組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織。
方法簡介:
公司實驗室分離的人角膜成纖維采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的人角膜成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養步驟:
一、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中),培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
二、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
a)、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加5ml以上含10%血清的培養基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養液,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養液的新皿中或者瓶中。
b)、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補加1-2ml培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產品:
小鼠血栓素試劑盒 小鼠血栓素試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠血栓素試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠血栓素試劑盒、小鼠血栓素試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
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小鼠血清淀粉樣蛋白試劑盒 小鼠血清淀粉樣蛋白試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠血清淀粉樣蛋白試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠血清淀粉樣蛋白試劑盒、小鼠血清淀粉樣蛋白試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠性激素結合球蛋白(SHBG)ELISA 試劑盒 96T/48T
Hei Amy Ba aigen ELISA Kit 人痢疾內阿米巴抗原試劑盒
Humanprostacycline,PGIELISAKit 人前列環素(PGI)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Chickenadrenomedullin,ADM試劑盒雞腎上腺髓質素(ADM)試劑盒規格:96T/48T
載玻片細胞AKT蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseHya]uronatebindingprotein,HABPELISAKit小鼠透明質酸結合蛋白(HABP)試劑盒規格:96T/48T
神經束蛋白抗體
6號染色體開放閱讀框186抗體
TACSTD2重組人 TROP2 / TACSTD2 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
性激素結合球蛋白(SHBG)重組蛋白 Recombinant Sex Hormone Binding Globulin (SHBG)
GH1重組人 GH1 / Growth hormone 1 蛋白 Protein
CD69 Protein Human 重組人 CD69 蛋白
Spike Protein SARS 重組SARS Spike 蛋白 (Receptor Binding Domain, His 標簽)
性激素結合球蛋白(SHBG)重組蛋白 Recombinant Sex Hormone Binding Globulin (SHBG)
CD69 Protein Human 重組人 CD69 蛋白
TACSTD2重組人 TROP2 / TACSTD2 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
Spike Protein SARS 重組SARS Spike 蛋白 (Receptor Binding Domain, His 標簽)
GH1重組人 GH1 / Growth hormone 1 蛋白 Protein
人角膜成纖維細胞大鼠胸腎表達趨化因子(BRAK)試劑盒 ,英文名: BRAK ELISA Kit
Pla gibberellic acid (GA) ELISA Kit 植物赤霉素(GA)試劑盒
MouseCollageypeⅢ,ColⅢELISAKIT 小鼠Ⅲ型膠原(ColⅢ)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanAi-ThrombinIII,AT-IIIELISAKit人抗Ⅲ抗體
細胞FES激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitBigET大鼠大內皮素
收到細胞如何處理?
1、首先,觀察細胞培養瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象。若有,請拍照,并及時與技術支持聯系(所拍照片將作為后續服務依據)。
2、用75%酒精擦拭細胞培養瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養瓶蓋,將細胞置于細胞培養箱內靜置培養2-4小時,以便穩定細胞狀態。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細胞形態、所用基礎培養基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(所拍照片將作為后續服務依據);建議細胞傳代培養后,定期拍照、記錄細胞生長狀態。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養瓶內培養基,預留5ml左右繼續培養,直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內,1200rpm離心5min,離心后上清培養基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養瓶內培養,補加培養基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續培養,直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作