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更新時間:2024-10-30
人Ⅱ型肺泡上皮細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
肺組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7622 |
細胞簡介:
人Ⅱ型肺泡上皮分離自肺組織;肺泡由單層上皮細胞構成的半球狀囊泡。肺中的支氣管經多次反復分枝成無數細支氣管,它們的末端膨大成囊,囊的四周有很多突出的小囊泡,即為肺泡。小肺泡細胞,又稱I型肺泡細胞,厚約0.1微米,基底部是基底膜,無增殖能力。大肺泡細胞,又稱Ⅱ型肺泡細胞,分泌表面活性物質(二棕櫚酰脂),以降低肺泡表面張力。Ⅱ型肺泡細胞位于Ⅰ型肺泡細胞之間,數量較Ⅰ型肺泡細胞多,但覆蓋面積比Ⅰ型肺泡細胞小。細胞立方形或圓形,頂端突入肺泡腔。細胞核圓形,胞質著色淺、呈泡沫狀。電鏡下,細胞游離而有少量微絨毛,胞質內富含線粒體和溶酶體,有較發達的粗面內質網和高爾基復合體。核上方有較多的分泌顆粒,電子密度高、大小不等,直徑約0.1-1.0μm顆粒內含有平行排列的板層狀結構,稱為嗜餓性板層小體。小體內的主要成分為磷脂,以二棕櫚酰為主,此外還有糖胺多糖及蛋白質等。顆粒內物質釋放出來后,在肺泡表面形成一層粘液層,稱為表面活性物質(surfactant)。表面活性物質有降低肺泡表面張力、穩定肺泡大小的作用。呼氣時肺泡縮小,表面活性物質密度增加,表面張力降低,防止肺泡過度塌陷;吸氣時肺泡擴張,表面活性物質密度減小,肺泡回縮力加大,可防止肺泡過度膨脹。表面活性物質的缺乏或變性均可引起肺不張,過度通氣可造成表面活性物質缺乏;吸入毒氣可直接破壞表面活性物質。Ⅱ型肺泡細胞有分裂、增殖并分化為Ⅰ型肺泡細胞的潛能,故具有修復受損傷上皮的作用。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的人Ⅱ型肺泡上皮采用彈性蛋白酶消化法制備而來制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的人Ⅱ型肺泡上皮經SP-C免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代左右
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
(Fibrinogen) 作用: ELISA 規格: 進口分裝
人 Foxp3(Foxp3) 作用: ELISA 規格: 進口分裝
半乳糖凝集素 7 ( Galectin-7 ) 作用: ELISA 規格: 進口分裝
胃泌素 (Gasin) 作用: ELISA 規格: 進口分裝
小鼠二0酸腺苷(ADP)ELISA 試劑盒
Rat endostatin (ES) ELISA Kit 大鼠內皮抑素(ES)試劑盒
HumanactivatedcoagulationfactorⅫ,FⅫaELISAKit 人活化Ⅻ(FⅫa)試劑盒 進口分裝
Humanapoptosissignalregulatingkinase1,ASK-1試劑盒人凋亡信號調節激酶I(ASK-1)試劑盒
植物乙醇酸氧化酶(glycolateoxidase)活性比色法定量試劑盒20次
Humaissueinhibitorsofmetalloproteinase2,TIMP-2ELISAKit人基質金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)試劑盒
磷酸化調節元件結合蛋白2抗體
血管動蛋白抗體
FCGR4重組小鼠 CD16-2 / FCGR4 蛋白 (His & AVI 標簽) Protein
Adenylate Kinase 1 (AK-1 0.5mgAdenylate Kinase 1 (AK-1) 腺苷酸激酶-1
FAM19A2重組人 FAM19A2 蛋白 Protein
FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His & AVI 標簽), Biotinylated
CLEC1A Protein Rat 重組大鼠 CLEC1A / CLEC-1 蛋白
Adenylate Kinase 1 (AK-1 0.5mgAdenylate Kinase 1 (AK-1) 腺苷酸激酶-1
FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His & AVI 標簽), Biotinylated
FCGR4重組小鼠 CD16-2 / FCGR4 蛋白 (His & AVI 標簽) Protein
CLEC1A Protein Rat 重組大鼠 CLEC1A / CLEC-1 蛋白
FAM19A2重組人 FAM19A2 蛋白 Protein
人Ⅱ型肺泡上皮細胞大鼠誘導型合酶(NOS2)試劑盒 ,英文名: NOS2 ELISA Kit
Mouse follistatin (FS) ELISA Kit 小鼠卵泡抑素(FS)試劑盒
Mousemaixmetalloproteinase3,MMP-3ELISAkit 小鼠基質金屬蛋白酶3(MMP-3)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforHumanEamoebahistolyticaAigenELISAKit人痢疾內阿米巴抗原
細胞3-0酸甘油脫氫酶(GAPDH)活性酶動力比色法定量試劑盒20次
ELISAKitACV-RAb大鼠活化素A受體抗體
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