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更新時間:2024-10-29
大鼠支氣管上皮細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
支氣管組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7032 |
細胞簡介:
大鼠支氣管上皮分離自支氣管組織;支氣管(Bronchi),是指由氣管分出的各級分枝,由氣管分出的一級支氣管,即左、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較,前者較細長,走向傾斜;后者較粗短,走向較前者略直,所以經氣管墮入的異物多進入右主支氣管。支氣管和氣管還有以區別就是,氣管是以“C"型的氣管軟骨為支架,而支氣管不是。支氣管上皮是氣道與外界環境接觸的道防線,不僅是各種病原體、炎癥介質作用的靶細胞,還作為效應細胞合成、釋放多種炎性介質和細胞因子,從而參與氣道炎癥及免疫反應。支氣管上皮細胞在哮喘、慢性阻塞性肺疾病、肺癌、肺囊性纖維化以及一些感染性呼吸道疾病的發病機制中均起著重要的作用。體外培養的原代支氣管上皮細胞因與體內組織在形態結構和功能活動上存在很大的相似性,因此,在基礎及臨床研究中極為重要。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠支氣管上皮采用-混合消化法結合機械刮刷并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠支氣管上皮經PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
小鼠可溶性細胞間粘附分子-1 英文名稱: Soluble Iercellular Adhesion Molecule-1 規格: 英文縮寫: sICAM-1
小鼠干擾素-α 英文名稱: Ierferon α 規格: 英文縮寫: IFN-α
小鼠干擾素-β 英文名稱: Ierferon β 規格: 英文縮寫: IFN-β
小鼠干擾素-γ 英文名稱: Ierferon γ 規格: 英文縮寫: IFN-γ
小鼠牛血清白蛋白(BSA)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat methylase ELISA Kit (Methylase) 大鼠甲基化酶(Methylase)試劑盒
Humandynamin2,DNM2ELISAKit 人發動蛋白2(DNM2)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Human11-dehydro-thromboxaneB2,11-DH-TXB2試劑盒人11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)試劑盒規格:96T/48T
真菌/酵母細胞線粒體分離(活性)試劑盒10次
MouseAquaporin4,AQP-4ELISAKit小鼠水通道蛋白4(AQP-4)試劑盒規格:96T/48T
金屬還原酶硬脂酸4抗體
線粒體核糖核酸酶P蛋白3抗體
NTRK3重組小鼠 TrkC / NTRK3 蛋白 Protein
CD177/NB1 peptide 嗜中性粒細胞抗原CD177抗原 0.5mgCD177/NB1 peptide 嗜中性粒細胞抗原CD177抗原
AK1重組人 AK1 / Adenylate kinase 1 蛋白 Protein
CSF3R Protein Human 重組人 G-CSFR / CD114 蛋白
CD274 Protein Rat 重組大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白
CD177/NB1 peptide 嗜中性粒細胞抗原CD177抗原 0.5mgCD177/NB1 peptide 嗜中性粒細胞抗原CD177抗原
CSF3R Protein Human 重組人 G-CSFR / CD114 蛋白
NTRK3重組小鼠 TrkC / NTRK3 蛋白 Protein
CD274 Protein Rat 重組大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白
AK1重組人 AK1 / Adenylate kinase 1 蛋白 Protein
大鼠支氣管上皮細胞大鼠脂聯素受體1(ADIPOR1)試劑盒 ,英文名: ADIPOR1 ELISA Kit
Mouse soluble endothelial protein C receptor (sEPCR) ELISA Kit 小鼠可溶性血管內皮細胞蛋白C受體(sEPCR)試劑盒
Mouseglucoprotein130,gp130ELISAKIT 小鼠糖蛋白130(gp130)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanhistoneH2A-H2B-DNAaoaibodyELISAKit人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體
B3高效液相色譜法定量試劑盒20次
ELISAKitCollagenaseI大鼠膠原酶I
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