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更新時間:2024-10-29
大鼠陰道壁成纖維細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
陰道組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7746 |
細胞簡介:
大鼠陰道壁成纖維分離自陰道組織;陰道位于膀胱、尿道和直腸之間,是一個富有彈性的管狀器官。它在人類生殖過程中具有多種生理功能,是連接子宮與外陰的通道,是排出月經血、娩出嬰兒的必經之路,也是一個重要的性交器官。陰道壁按組織學由外到內分三層,即黏膜層、肌層和外膜。1)黏膜層由上皮和固有膜組成。上皮較厚,為復層鱗狀上皮,從基底層到表層由基底層、旁基底層、中間層和表層組成。沒有角化層。陰道粘膜的基底層呈細波紋狀起伏。2)肌層由平滑肌組織構成,肌束排列不規則,縱行和環形互相交錯。肌束間有較多的結締組織和彈性纖維。陰道外口有環形的橫紋肌稱括約肌。3)外膜層為纖維膜,由結締組織構成,內含豐富的彈性纖維、靜脈叢、淋巴管和神經。大鼠陰道壁成纖維細胞主要分離自外膜層,成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠陰道壁成纖維采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠陰道壁成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3-5代左右;3代以內狀態最佳
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)ElisaKit ELISA. 96T/48T
小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)ElisaKit ELISA. 96T/48T
小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠血管緊張素轉化酶(ACE)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠Ⅸ(FⅨ)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human coagulation factor VIII related aigen (VIII -Ag) ELISA Kit 人Ⅷ相關抗原(Ⅷ-Ag)試劑盒
Humanenkephalin,ENKELISAKit 人腦啡肽(ENK)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Human17-Hydroxycoicosteroids,17-OHCS試劑盒人17羥皮質類固醇(17-OHCS)試劑盒規格:96T/48T
真菌/酵母細胞線粒體內膜功能/膜電位測定試劑盒20次
MouseAquaporin1,AQP-1ELISAKit小鼠水通道蛋白1(AQP-1)試劑盒規格:96T/48T
甲基丙二酰異構酶抗體
細胞連接相關蛋白2抗體
CD84重組小鼠 CD84 蛋白 Protein
UL16結合蛋白2(ULBP2)重組蛋白 Recombinant UL16 Binding Brotein 2 (ULBP2)
EPHA3重組人 EphA3 蛋白 Protein
CSNK1A1 Protein Human 重組人 CSNK1A1 / CKI-alpha / CK1 蛋白 (GST 標簽)
EPCAM Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 (Fc 標簽)
鈣結合蛋白(CR)重組蛋白 Recombinant Calretinin (CR)
CSNK1A1 Protein Human 重組人 CSNK1A1 / CKI-alpha / CK1 蛋白 (GST 標簽)
PTPRC重組小鼠 CD45 / PTPRC 蛋白 (aa 453-1152, His & GST 標簽) Protein
IL13 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL13 / ALRH 蛋白
CRIPT重組人 CRIPT / cysteine-rich PDZ-binding 蛋白 Protein
大鼠陰道壁成纖維細胞大鼠中性粒細胞激活蛋白3(NAP3)試劑盒 ,英文名: NAP3 ELISA Kit
Mouse soluble cell differeiation aigen 86 (B7-2/sCD86) ELISA Kit 小鼠可溶性白細胞分化抗原86(B7-2/sCD86)試劑盒
MouseFibronectin,FNELISAKit 小鼠纖連蛋白(FN)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanhypotheticalproteinLOC433328ELISAKit人假定蛋白LOC433328
B12高效液相色譜法定量試劑盒20次
ELISAKitCTGF大鼠結締組織生長因子