服務熱線
021-59989018
產品簡介:
產品型號:
廠商性質:經銷商
訪問量:109
更新時間:2024-10-29
大鼠胰腺導管上皮細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
胰腺組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7075 |
細胞簡介:
大鼠胰腺導管上皮分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶、等。胰液通過胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質、脂肪和糖的作用。內分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成,胰島主要由4種細胞組成:α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β細胞分泌胰島素,降低血糖;γ細胞分泌,以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌;PP細胞分泌胰多肽,抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。成體胰腺導管上皮細胞作為胰腺前體細胞,已證實具多向分化潛能,在合適的外源性刺激下可分化成胰島樣細胞,胰腺導管上皮細胞轉分化的胰島樣細胞免疫原性如何,轉分化的胰島樣細胞在治療糖尿病時是否發生免疫排斥反應,對干細胞臨床治療糖尿病具有重要意義。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠胰腺導管上皮采用-膠原酶混合消化法結合密度梯度離心法、差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠胰腺導管上皮經Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
小鼠淋巴細胞功能相關抗原3(LFA-3/CD58)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠可溶性血小板內皮細胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠透明質酸(HA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat somal cell derived factor 1A (SDF-1a/CXCL12) ELISA Kit 大鼠基質細胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)試劑盒
Humanai-cyclicciullinatedpeptide,CCPELISAKit 人抗環胍肽抗體(CCP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HeneggImmunoglobulinofYolk,IgY試劑盒雞卵黃免疫球蛋白(IgY)試劑盒規格:96T/48T
真菌/酵母細胞細胞壁分離試劑盒20次
mouseBeta-Endorphin,β-EPELISAKit小鼠β內啡肽(β-EP)試劑盒規格:96T/48T
肌微管素相關蛋白11抗體
細胞表面趨化因子受體6(CD196)抗體
F3重組大鼠 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 蛋白 Protein
ER-alpha 雌激素受體alpha 0.5mgER-alpha 雌激素受體alpha
IGFBP6重組人 IGFBP6 / IBP-6 蛋白 Protein
CSF1R Protein Human 重組人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (aa 543-922, His & GST 標簽)
CEACAM1 Protein Mouse 重組小鼠 CEACAM1 / CD66a 蛋白
ER-alpha 雌激素受體alpha 0.5mgER-alpha 雌激素受體alpha
CSF1R Protein Human 重組人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (aa 543-922, His & GST 標簽)
F3重組大鼠 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 蛋白 Protein
CEACAM1 Protein Mouse 重組小鼠 CEACAM1 / CD66a 蛋白
IGFBP6重組人 IGFBP6 / IBP-6 蛋白 Protein
大鼠胰腺導管上皮細胞大鼠腫瘤壞死因子α(TNFα)試劑盒 ,英文名: TNFα ELISA Kit
Mouse soluble P selectin (sP-selectin) ELISA Kit 小鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)試劑盒
MouseErythropoietin,EPOELISAKit 小鼠紅細胞生成素(EPO)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanImmunoglobulinA,IgAELISAKitA
微型RNA(miRNA)文庫構建技術試劑盒5次
ELISAKitMT大鼠金屬硫蛋白