服務熱線
021-59989018
產品簡介:
產品型號:
廠商性質:經銷商
訪問量:100
更新時間:2024-10-29
大鼠羊膜胚胎細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
胎盤組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7679 |
細胞簡介:
大鼠胚胎羊膜分離自羊膜組織;羊膜為單層上皮細胞互相連接構成的薄膜。單層上皮細胞具有分泌羊水的作用。隨著胚胎的生長發育,羊膜與絨毛密切緊貼,形成胎膜。胎膜隨著羊膜腔逐漸擴大而呈半透明的薄膜,無血管,富有韌性(胎膜也就是羊膜腔的囊壁)。羊膜腔內充滿的液體為羊水。羊膜僅覆蓋在胎盤的兒體面,并不深入胎盤組織中,隨著妊娠的進展羊膜腔逐漸擴大,占據整個子宮腔,羊膜是胎膜最內一層,是一層半透明的薄膜,與覆蓋在胎盤、臍帶的羊膜層相連接。羊膜是胎盤的最內層,與人眼結膜組織結構相似,含有眼表上皮細胞,包括結膜細胞和角膜上皮細胞生長所需要的物質,其光滑,無血管、神經及淋巴,具有一定的彈性,厚0.02~0.5mm,在電鏡下,其分為五層:上皮層、基底膜、致密層、纖維母細胞層和海綿層,羊膜基底膜和羊膜基質層含有大量不同的膠元,主要為i、iii、iv、v、vii型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份,正是這些成份使羊膜可以充當“移植的基底膜"而發揮一種新的健康合適的基質。羊膜細胞主要由羊膜上皮細胞和羊膜間充質細胞組成,均具有多分化潛能,可轉化為神經元,且還有合成、釋放生物活性物質和神經營養因子的功能。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠羊膜胚胎采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠羊膜胚胎經PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 梭形、多角形
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
小鼠CD3分子試劑盒 小鼠CD3分子試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠CD3分子試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠CD3分子試劑盒、小鼠CD3分子試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠β-防御素試劑盒 小鼠β-防御素試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠β-防御素試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠β-防御素試劑盒、小鼠β-防御素試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠肝病毒試劑盒 小鼠肝病毒試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠肝病毒試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠肝病毒試劑盒、小鼠肝病毒試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
豬流感病毒A試劑盒 豬流感病毒A試劑盒 規格型號:96T/48T 豬流感病毒A試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:豬流感病毒A試劑盒、豬流感病毒A 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠(T)ELISA 試劑盒
Human cyclophilin B (CyPB) ELISA Kit 人嗜環蛋白/親環素B(CyPB)試劑盒
HumanPodocalyxin,PCXELISAKit 人足細胞標記蛋白(PCX)試劑盒 進口分裝
HumanAi-ThrombinⅢ,AT-Ⅲ試劑盒人抗Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)試劑盒
植物線粒體粗提分離試劑盒10次
HumaniggeringReceptorExpressesonMyeloidCells-1,EM-1ELISAKit人髓系細胞觸發受體-1(EM-1)試劑盒
磺基轉移酶抗體1C2抗體
微管蛋白δ1/δ Tubulin抗體
CA9重組人 Carbonic Anhydrase IX / CA9 蛋白 Protein
抗增殖細胞核抗原(PCNA)重組蛋白 Recombinant Proliferating Cell Nuclear Antigen (PCNA)
IL17A重組人 IL17 / IL17A 蛋白 Protein
FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, Fc 標簽)
HA Protein H7N2 重組甲型流感 H7N2 (A/ruddy turnstone/New Jersey/563/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽)
抗增殖細胞核抗原(PCNA)重組蛋白 Recombinant Proliferating Cell Nuclear Antigen (PCNA)
FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, Fc 標簽)
CA9重組人 Carbonic Anhydrase IX / CA9 蛋白 Protein
HA Protein H7N2 重組甲型流感 H7N2 (A/ruddy turnstone/New Jersey/563/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽)
IL17A重組人 IL17 / IL17A 蛋白 Protein
大鼠羊膜胚胎細胞大鼠腫瘤壞死因子受體超家族成員1B(TNFRSF1B)試劑盒 ,英文名: TNFRSF1B ELISA Kit
Mouse granzyme A (Gzms-A) ELISA Kit 小鼠顆粒酶A(Gzms-A)試劑盒
MouseClusterofdiffereiation30,CD30ELISAKit 小鼠白細胞分化抗原30(CD30)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforHumanimmunosuppressiveacidicprotein,IAPELISAKit人免疫抑制酸性蛋白
微型RNA(miRNA)目標基因探測試劑盒5次
ELISAKitMIP-2大鼠巨噬細胞性蛋白2