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更新時間:2024-10-29
大鼠心臟微血管周細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
心臟組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7645 |
細胞簡介:
大鼠心臟微血管周分離自心臟組織;心臟是脊椎動物身體中重要的一個器官,主要功能是為血液流動提供壓力,把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構成,左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開,故互不相通,心房與心室之間有瓣膜(房室瓣),這些瓣膜使血液只能由心房流入心室,而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動,向器官、組織提供充足的血流量,以供應氧和各種營養物質,并帶走代謝的終產物(如二氧化碳、無機鹽、尿素和尿酸等),使細胞維持正常的代謝和功能。心臟微血管內皮細胞是組成心臟微血管腔面單層扁平上皮樣細胞,它所產生和分泌的生物活性物質對維持血管張力、調節血壓、抗血栓形成等有重要作用,在心臟血管疾病的發病機制中有重要病理生理學意義。近年來大量研究表明,心肌微血管周細胞的功能和病理改變直接影響心肌細胞功能,也是諸多毒素、炎癥因子及病毒等重要靶位,其作為體外研究的細胞模型在心肌缺血-再灌注發病機制和細胞間旁分泌細胞生長因子研究中起著重要作用。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠心臟微血管周采用膠原酶消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠心臟微血管周經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3-5代左右;3代以內狀態佳
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
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器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
山羊白介素2受體(IL-2R)試劑盒 96T/48T
山羊白介素2(IL-2)試劑盒 96T/48T
山羊白介素10(IL-10)試劑盒 96T/48T
山羊γ干擾素(IFN-γ)試劑盒 96T/48T
豚鼠內皮素1(EDN1)試劑盒 ,英文名: EDN1 ELISA Kit
Human parathyroid hormone related peptide (PTHrp) ELISA Kit 人副甲狀旁腺激素相關肽(PTHrp)試劑盒
rabbitImmunoglobulinA,IgAELISAKit 兔子免疫球蛋白A(IgA)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforBALP(Humanbonealkalinephosphatase)ELISAKit人骨堿性0酸酶
線蟲β-半乳糖苷酶化學發光定量試劑盒20次
RabbitcoagulationfactorⅡ,FⅡELISAKit兔子Ⅱ(FⅡ)試劑盒規格:96T/48T
睪丸酸性磷酸酶抗體
雙特異性磷酸酶22抗體
EDA2R重組小鼠 XEDAR / EDA2R 蛋白 (Fc 標簽) Protein
發動蛋白2(DNM2)重組蛋白 Recombinant Dynamin 2 (DNM2)
GADD45G重組人 GADD45G / CR6 蛋白 Protein
IL17F Protein Human 重組人 IL-17F / Interleukin-17F 蛋白
IL23R Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL23R / IL23 Receptor 蛋白 (Fc 標簽)
Ras相關C3肉毒菌毒素底物1(Rac1)重組蛋白 Recombinant Ras Related C3 Botulinum Toxin Substrate 1 (Rac1)
IL17F Protein Human 重組人 IL-17F / Interleukin-17F 蛋白
PRDX1重組小鼠 Peroxiredoxin 1 / PRDX1 蛋白 Protein
IL21R Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白
C10ORF54重組人 B7-H5 / Gi24 / VISTA 蛋白 Protein
大鼠心臟微血管周細胞大鼠棕櫚?;さ鞍?span>2(MPP2)試劑盒 ,英文名: MPP2 ELISA Kit
Ma beta amyloid (A beta 1-40 1-40) ELISA Kit 馬β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)試劑盒
Mousesolublemyosinheavychain1,sMHC-1ELISAKit 小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanLinkerforactivationofTcell,LATELISAKit人T細胞活化連接蛋白
土壤細菌DNA分離試劑盒50次
ELISAKitAECA大鼠抗內皮細胞抗體
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
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