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基礎信息Product information
產(chǎn)品名稱:

大鼠心肌成纖維細胞

產(chǎn)品簡介:

大鼠心肌成纖維細胞公司正在出售的產(chǎn)品:HRAS樣抑制因子2抗體 GLP1類似蛋白Exendin4抗體 PSD95相關緊密連接蛋白PATJ抗體 大鼠胸腺淋巴細胞 小鼠海馬神經(jīng)元細胞 MKN1人胃癌細胞 NRK (大鼠腎細胞)

產(chǎn)品型號:

廠商性質:經(jīng)銷商

訪問量:122

更新時間:2024-10-29

產(chǎn)品特性Product characteristics

大鼠心肌成纖維細胞

大鼠心肌成纖維細胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細胞形態(tài)

貨號

心臟組織

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

成纖維細胞樣

YS-01X7271

細胞簡介:

大鼠心肌成纖維分離自心臟組織;心臟由心肌細胞和非心肌細胞組成,非心肌細胞占細胞總數(shù)的70%,其中90%以上的非心肌細胞由心肌成纖維細胞組成。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的心肌成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。近年來,人們逐漸了解到非心肌細胞不僅對心肌細胞具有結構上的支持、保護作用,而且還具有自分泌和旁分泌功能,影響心肌細胞的結構和生理功能;心肌成纖維細胞主要功能為對心肌細胞起結構支持作用并負責細胞基質外的合成,當心肌損傷時能產(chǎn)生旁分泌生長因子。心肌成纖維細胞是心臟結締組織中常見的細胞,可合成和分泌膠原纖維、彈性纖維、網(wǎng)狀纖維及有機基質,并且在外傷等因素刺激下,部分纖維細胞可重新轉變?yōu)橛字傻某衫w維細胞,其功能活動也得以恢復,參與組織損傷后的修復。因此,對心肌成纖維細胞的生理學研究成為現(xiàn)代心血管領域研究的一個重點。

方法簡介:

公司實驗室分離的大鼠心肌成纖維采用膠原酶-聯(lián)合消化結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測:

公司實驗室分離的大鼠心肌成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO25%

大鼠心肌成纖維細胞

細胞傳代及凍存:

細胞傳代步驟細胞凍存步驟
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

  ② 消化培養(yǎng)法

  ③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

  ④器官培養(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。

大鼠心肌成纖維細胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

兔血凝素樣氧化低密度脂蛋白受體1   英文名稱:   Rabbit Lctin like oxLDL Receptor 1   規(guī)格:      英文縮寫:   LOX-1

兔脂氧合酶同工酶   英文名稱:   Rabbit Lipoxygenase Isozymes   規(guī)格:      英文縮寫:   LOXI

兔基質金屬蛋白酶 1   英文名稱:   Rabbit Maix Metalloproteinase 1   規(guī)格:      英文縮寫:   MMP-1

兔基質金屬蛋白酶 2   英文名稱:   Rabbit Maix Metalloproteinase 2   規(guī)格:      英文縮寫:   MMP-2

小鼠αN已酰基葡糖苷酶(αNAG)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat aquaporin 3 (AQP-3) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白3(AQP-3)試劑盒

Humanplacealactogen,HPLELISAKit 人胎盤催乳素(HPL)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanChromogranin,CgA試劑盒人嗜鉻蛋白A(CgA)試劑盒規(guī)格:96T/48T

總脂肪酶(lipase)定量試劑盒50

Humansalivaryductaoaibody,SDAELISAKit人抗唾液腺導管組織抗體(SDA)試劑盒規(guī)格:96T/48T

肝腸鈣粘連蛋白重組兔單克隆抗體

生物鐘KAT13D蛋白抗體

CD63重組大鼠 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白 (Fc 標簽) Protein

CT (Calcitonin 0.5mgCT (Calcitonin ) 降鈣素(抗原)

FCER2重組人 CD23 / FCER2 蛋白 Protein

H1F0 Protein Human 重組人 H1F0 / Histone H1 蛋白

PCSK9 Protein Mouse 重組小鼠 PCSK9 / NARC1 蛋白

CT (Calcitonin 0.5mgCT (Calcitonin ) 降鈣素(抗原)

H1F0 Protein Human 重組人 H1F0 / Histone H1 蛋白

CD63重組大鼠 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白 (Fc 標簽) Protein

PCSK9 Protein Mouse 重組小鼠 PCSK9 / NARC1 蛋白

FCER2重組人 CD23 / FCER2 蛋白 Protein

大鼠心肌成纖維細胞大鼠組蛋白H2A(H2A)試劑盒 ,英文名: H2A ELISA Kit

Mouse ai thyroglobulin aibody (ATGA/TGAB) ELISA Kit 小鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)試劑盒

MouseIerleukin1receptoraagonist,IL-1raELISAkit 小鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanlymphocytefunctionassociatedaigen2,LFA-2ELISAKit人淋巴細胞功能相關抗原2

土壤元素熒光定量試劑盒20

ELISAKitdsDNA大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體

原代細胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂浮;

  7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;

  3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;

  5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。


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