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更新時間:2024-10-29
大鼠小腸血管內皮細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
小腸組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 內皮細胞樣 | YS-01X7147 |
細胞簡介:
大鼠小腸血管內皮分離自小腸組織;小腸位于腹中,上端接幽門與胃相通,下端通過闌門與大腸相連,是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內,上連胃幽門,下接盲腸,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內消化是至關重要的,因為食物經過小腸內胰液、膽汁和小腸液的化學性消化及小腸運動的機械性消化后,基本上完成了消化過程,同時營養物質被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構成。其結構特點是管壁有環形皺襞,粘膜有許多絨毛,絨毛根部的上皮下陷至固有層,形成管狀的腸腺,其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關系密切;構成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和內分泌細胞與絨毛上皮相似,接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似,絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短,不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運動功能,其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細胞的收縮是負責腸蠕動的動力,促使食物向下運動。血管內皮細胞除了吞噬異物、細菌、壞死和衰老的組織等,還參與集體免疫活動,包括:①血管收縮及血管舒張,從而控制血壓;②凝血(血栓形成及纖維蛋白溶解);③動脈硬化;④血管生成;⑤炎癥及腫脹(浮腫);⑥內皮細胞亦控制一些物質,如白血球進出血管。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠小腸血管內皮采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠小腸血管內皮經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 內皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
小鼠褪黑素(MT)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠熱休克因子1(HSF1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠血小板因子3(PF-3)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠透明質酸結合蛋白(HABP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat receptor activator of nuclear factor kappa B ligand (RANKL) ELISA Kit 大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)試劑盒
HumanICEprotease-activatingfactor,IRAPELISAKit 人ICE蛋白酶激活因子(IRAP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
ChickensolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCR試劑盒雞可溶性血管內皮細胞蛋白C受體(sEPCR)試劑盒規格:96T/48T
載玻片細胞PDGF-A蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseFibrinogen,FbgELISAKit小鼠血纖蛋白原(Fbg)試劑盒規格:96T/48T
鈣/鈣調素依賴蛋白激酶2α抗體
神經調節蛋白3抗體
EPHB4重組人 EphB4 / HTK 蛋白 Protein
熱休克蛋白47(HSP47)重組蛋白 Recombinant Heat Shock Protein 47 (HSP47)
FAM20B重組人 FAM20B / Gxk1 蛋白 (Fc 標簽) Protein
CFH Protein Human 重組人 Complement Factor H / CFH 蛋白
NA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 神經酸酶 (Neuraminidase / NA) (R292K mutation) (高活性)
熱休克蛋白47(HSP47)重組蛋白 Recombinant Heat Shock Protein 47 (HSP47)
CFH Protein Human 重組人 Complement Factor H / CFH 蛋白
EPHB4重組人 EphB4 / HTK 蛋白 Protein
NA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 神經酸酶 (Neuraminidase / NA) (R292K mutation) (高活性)
FAM20B重組人 FAM20B / Gxk1 蛋白 (Fc 標簽) Protein
大鼠小腸血管內皮細胞大鼠組蛋白乙?;D移酶1(HAT1)試劑盒 ,英文名: HAT1 ELISA Kit
Nude mouse protein phosphatase (PP) ELISA Kit 裸鼠蛋酸酶(PP)試劑盒
MouseIerleukin-7,IL-7ELISAkit 小鼠白介素7(IL-7)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanmajorhistocompatibilitycomplexI,MHCI/HLAIELISAKit人主要組織相容性復合體Ⅰ類
土壤α活性DNS比色法定量試劑盒20次
ELISAKitACA-IgM大鼠抗心0脂抗體IgM
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
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