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產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
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更新時間:2024-10-29
大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
腦組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7357 |
細胞簡介:
大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)分離自腦組織;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個半球都有三個面,即外側(cè)面(約占整個皮質(zhì)面積的1/3)、內(nèi)側(cè)面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。小膠質(zhì)細胞是神經(jīng)膠質(zhì)細胞的一種,相當于腦和脊髓中的巨噬細胞,是中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)中的道也是最主要的一道免疫防線。小膠質(zhì)細胞大約占大腦中的神經(jīng)膠質(zhì)細胞的20%,小膠質(zhì)細胞不停地清除著中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的損壞的神經(jīng),斑塊及感染性物質(zhì)。無數(shù)臨床上和理學研究表明激活的小膠質(zhì)細胞在神經(jīng)退化類疾病的發(fā)病機理中起到十分重要的作用,如帕金森病、多發(fā)性硬化和阿茲海默癥等。但是過多激活或失控的小膠質(zhì)細胞會引起神經(jīng)毒性。它們是促炎因子和氧化應(yīng)激的重要來源,如腫瘤壞死因子(TNF),一氧化氮,白介素等有神經(jīng)毒性的物質(zhì)。神經(jīng)小膠質(zhì)細胞的主要功能:①神經(jīng)膠質(zhì)出現(xiàn)在大腦發(fā)育早期向成熟階段轉(zhuǎn)化的過程中;②當程序性細胞死亡時,或在大腦發(fā)育的過程中,中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損或受到病理損壞時,神經(jīng)膠質(zhì)可做為大腦的巨噬細胞;③膠質(zhì)細胞能在Ⅱ類組織相容性復合體表達CD-4陽性T細胞時表達抗原,能進行Fc介導的巨噬作用,并且與造血細胞和巨噬細胞組織共享抗原。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)采用酶消化法結(jié)合差速貼壁法,在培養(yǎng)基營養(yǎng)缺失數(shù)天后經(jīng)搖床震蕩收集脫落細胞制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)經(jīng)CD11b免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液(12mM)
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豬(HYD)ELISAKit ELISA.
豬(NO)ELISAKit ELISA.
豬內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISAKit ELISA.
豬內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)ELISAKit ELISA.
豬促甲狀腺素釋放激素(H)ELISA 試劑盒
Human macrophage inflammatory protein 2 (MIP-2) ELISA Kit 人巨噬細胞性蛋白2(MIP-2)試劑盒
Porcinegrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISAKit 豬生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAlphaActin(HumanAlpha-Actin)ELISAKit人α肌動蛋白
血液0酸二酯酶4(PDE4)活性熒光定量試劑盒10次
Mouseα-HydroxybyrateDehydrogenase,αHBDHELISAKit小鼠α羥基脫氫酶(αHBDH)試劑盒
β晶狀體蛋白B3抗體
磷酸化自噬相關(guān)蛋白9A抗體
CD3D重組食蟹猴 CD3d / CD3 delta 蛋白 (His 標簽) Protein
MMP-2 基質(zhì)金屬蛋白酶-2(多肽抗原 0.5mgMMP-2 基質(zhì)金屬蛋白酶-2(多肽抗原)
CCL8重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標簽) Protein
ALOX15B Protein Human 重組人 ALOX15B / 15 Lipoxygenase 2 蛋白
BTLA Protein Mouse 重組小鼠 BTLA 蛋白
MMP-2 基質(zhì)金屬蛋白酶-2(多肽抗原 0.5mgMMP-2 基質(zhì)金屬蛋白酶-2(多肽抗原)
ALOX15B Protein Human 重組人 ALOX15B / 15 Lipoxygenase 2 蛋白
CD3D重組食蟹猴 CD3d / CD3 delta 蛋白 (His 標簽) Protein
BTLA Protein Mouse 重組小鼠 BTLA 蛋白
CCL8重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標簽) Protein
大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞兔半胱酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA 試劑盒
Rat aldehyde dehydrogenase (ALDH) ELISA Kit 大鼠乙脫氫酶(ALDH)試劑盒
Humanskieactivefactor/inflammatoryfactor,SRF/IFELISAKit 人皮膚反應(yīng)因子/性因子(SRF/IF)試劑盒 進口分裝
HumanGlycogenphosphorylaseII,GP-II試劑盒人糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)試劑盒
組織蛋白酶(PROTEASE)活性比色法定量試劑盒20次
Humanmonocytechemotacticprotein2,MCP-2ELISAKit人單核細胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)試劑盒