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更新時間:2024-10-29
大鼠神經干細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
腦組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 球形 | YS-01X7437 |
細胞簡介:
大鼠神經干分離自腦皮層組織;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(灰質)覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經元胞體集中的地方。內部則是由神經纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面,即外側面(約占整個皮質面積的1/3)、內側面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。神經干細胞具有分化為神經神經元、星形膠質細胞和少突膠質細胞的能力,能自我更新,并足以提供大量腦組織細胞的細胞群。神經干細胞是一類具有分裂潛能和自更新能力的母細胞,它可以通過不對等的分裂方式產生神經組織的各類細胞。需要強調的是,在腦脊髓等所有神經組織中,不同的神經干細胞類型產生的子代細胞種類不同,分布也不同。神經干細胞作為干細胞的一種,它具有其它所有干細胞的基本特征:具有自我維持和自我更新能力,具有多種分化潛能,具有分化為本系統大部分類型細胞的能力,這種自我更新和分化潛能可以維持相當長的時間甚至終生,對損傷和疾病具有反應能力。神經干細胞在疾病、損傷狀態下具有增殖、遷移,并向神經細胞、星形膠質細胞和少突膠質細胞分化的能力,已成為神經系統損傷修復和再生研究的熱點,體外建立穩定的神經干細胞培養模型是其基礎和臨床應用的前提。神經干細胞在培養3-4d后,可形成神經球,神經球在培養基中呈懸浮生長,予以更換半量培基,1周后用吸管輕柔吹打球形克隆成為小的神經球和單細胞懸液,將部分細胞接種到新的培養瓶中,2×105個細胞/瓶,每7-10d傳代1次,每隔3d離心更換半量培養基1次,培養條件不變。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠神經干采用消化后差速貼壁,結合神經干細胞專用培養基培養篩選制備而來,總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠神經干經Nestin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基 含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細胞形態 球形
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%,Accutase
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
人著絲粒蛋白B試劑盒 人著絲粒蛋白B試劑盒 規格型號:96T/48T 人著絲粒蛋白B試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:人著絲粒蛋白B試劑盒、人著絲粒蛋白B 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
人Apelin36試劑盒 人Apelin 36試劑盒 規格型號:96T/48T 人Apelin 36試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:人Apelin 36試劑盒、人Apelin 36 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
雞白介素4試劑盒 雞白介素4試劑盒 規格型號:96T/48T 雞白介素4試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:雞白介素4試劑盒、雞白介素4 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠泰澤病原體試劑盒 小鼠泰澤病原體試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠泰澤病原體試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠泰澤病原體試劑盒、小鼠泰澤病原體試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
豚鼠白介素5(IL-5)試劑盒 ,英文名: IL-5 ELISA Kit
Human dynamin 2 (DNM2) ELISA Kit 人發動蛋白2(DNM2)試劑盒
RabbitIerleukin10,IL-10ELISAKit 兔子白介素10(IL-10)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforBeta-EP(humanBeta-Endorphin)ELISAKit人β內啡肽
細菌亞鹽還原酶總活性比色法定量試劑盒20次
RabbitGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRPELISAKit兔子生長激素釋放多肽(GHRP)試劑盒規格:96T/48T
ZC3H15蛋白抗體
磷酸化星形膠質細胞PEA15抗體
LAG3重組大鼠 LAG3 / CD223 / Lymphocyte activation gene 3 蛋白 Protein
DAPK1(Death associated protein kinase 1 0.5mgDAPK1(Death associated protein kinase 1) 凋亡相關蛋白激酶1抗原
STAT1重組人 STAT1 / p91 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
INSR Protein Human 重組人 Insulin Receptor / INSR / CD220 蛋白 (His & GST 標簽)
BMPR1A Protein Mouse 重組小鼠 ALK-3 / BMPR1A 蛋白
DAPK1(Death associated protein kinase 1 0.5mgDAPK1(Death associated protein kinase 1) 凋亡相關蛋白激酶1抗原
INSR Protein Human 重組人 Insulin Receptor / INSR / CD220 蛋白 (His & GST 標簽)
LAG3重組大鼠 LAG3 / CD223 / Lymphocyte activation gene 3 蛋白 Protein
BMPR1A Protein Mouse 重組小鼠 ALK-3 / BMPR1A 蛋白
STAT1重組人 STAT1 / p91 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
大鼠神經干細胞兔骨橋素(OPN)ELISA 試劑盒
Human ypsinogen II (y- II) ELISA Kit 人原Ⅱ(y-Ⅱ)試劑盒
Humanai-epidemichemorrhagicfevervirusIgGaibody,EHFIgGELISAKit 人抗流行性出血熱病毒抗體IgG(EHF)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanglathioneS-ansferases,GSTpi試劑盒人硫轉移酶pi基因(GSTpi)試劑盒規格:96T/48T
組織單胺氧化酶B型(MAO-B)活性比色法定量試劑盒20次
HumanMothersagainstdecapeaplegichomolog7,Smad7ELISAKit人Smad7試劑盒規格:96T/48T
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
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