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更新時間:2024-10-29
大鼠乳腺上皮細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
乳腺組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7087 |
細胞簡介:
大鼠乳腺上皮分離自乳腺組織;乳腺是復管泡狀皮膚腺,主要由腺上皮細胞組成,并具有特殊的泌乳功能。在妊娠期,導管末梢發育成腺泡;近年來的許多研究都表明乳腺癌、乳腺炎等的發生都與乳腺上皮細胞(MEC)有密切聯系,體外分離培養MECs即成為研究開展的關鍵步驟。乳腺是乳房的腺體組織,乳腺由導管和腺泡組成,腺泡是分泌乳汁的重要部分。乳腺的正常發育是由體內激素和局部合成的生長因子共同調控,其中乳腺表達的生長因子對乳腺上皮細胞的增殖、分化、凋亡產生極大的影響。乳腺上皮分離自分娩后3-5天的乳腺組織,為貼壁生長型細胞,呈多角形、圓形以及短梭形;乳腺上皮細胞主要功能即生乳功能。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠乳腺上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠乳腺上皮經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
溶酶體相關膜蛋白3 英文名稱: Human Lysosomal Associated membrane protein 3 規格: 英文縮寫: LAMP3
人乳酸脫氫酶 英文名稱: Human Lactate Dehydrogenase 規格: 英文縮寫: LDH
人 英文名稱: lysozyme 規格: 英文縮寫: LZM/LYS
甘露聚糖結合凝集素絲酸肽酶-2 英文名稱: mannan-binding lectin associated serine proteases 規格: 英文縮寫: MASP-2
豚鼠降鈣素基因相關肽(CGRP)試劑盒 ,英文名: CGRP ELISA Kit
Human factor related apoptosis (FAS/CD95) ELISA Kit 人凋亡相關因子(FAS/CD95)試劑盒
MonkeyMacrophageMigrationInhibitoryFactor,MIFELISAKit巨噬細胞移動抑制因子(MIF)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforbFGF-9(Humanbasicfibroblastgrowthfactor9)ELISAKit人堿性成纖維細胞生長因子9
細菌同還原酶(aldo-ketoreductase)總活性比色法定量檢測試劑20次
rabbitIerleukin6,IL-6ELISAKit兔子白介素6(IL-6)試劑盒規格:96T/48T
TATA盒結合蛋白相關因子TAF1C抗體
磷酸化內收蛋白gamma抗體
TNFSF12重組食蟹猴 / 人 TNFSF12 蛋白 (Fc 標簽) Protein
MAPK-1/2 原活化蛋白激酶(抗原 0.5mgMAPK-1/2 原活化蛋白激酶(抗原)
TPH1重組人 Tryptophan Hydroxylase 1 / TPH1 蛋白 Protein
IL1R2 Protein Human 重組人 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白
MERTK Protein Mouse 重組小鼠 MERTK / Mer 蛋白 (His & GST 標簽)
MAPK-1/2 原活化蛋白激酶(抗原 0.5mgMAPK-1/2 原活化蛋白激酶(抗原)
IL1R2 Protein Human 重組人 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白
TNFSF12重組食蟹猴 / 人 TNFSF12 蛋白 (Fc 標簽) Protein
MERTK Protein Mouse 重組小鼠 MERTK / Mer 蛋白 (His & GST 標簽)
TPH1重組人 Tryptophan Hydroxylase 1 / TPH1 蛋白 Protein
大鼠乳腺上皮細胞兔子白介素1(IL-1)ELISA 試劑盒
Human von Willebrand factor / ristocetin cofactor (VWF) ELISA Kit 人血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)試劑盒
HumanBlockingaibody,BAELISAKit 人封閉抗體(BA)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humaneyemuscleaibody,EMAb試劑盒人抗眼肌抗體(EMAb)試劑盒規格:96T/48T
組織TIE2激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
humanoncostatinMreceptor,OSMRELISAKit人制瘤素M受體(OSMR)試劑盒規格:96T/48T