服務熱線
021-59989018
產品簡介:
產品型號:
廠商性質:經銷商
訪問量:109
更新時間:2024-10-29
大鼠胚胎肝母細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
胚胎;肝臟 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7652 |
細胞簡介:
大鼠胚胎肝母分離自胚胎肝組織;肝臟是身體內以代謝功能為主的一個器官,并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質的合成等作用;肝臟也制造消化系統中之膽汁。肝臟是機體內臟里最大的器官,位于機體中的腹部位置,在右側橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機體消化系統中最大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟起源于腹側前腸內胚層細胞(一種多潛能干細胞)。在 ED8.5 的小鼠和 ED9.5 的大鼠,前腸的原始上皮細胞接觸心肌中胚層后快速增殖,形成肝原基。大約1d后,原始上皮細胞侵入原始橫膈,繼續分化為幼稚肝臟上皮細胞,這些細胞先表達 AFP 然后是ALb。幼稚肝臟上皮細胞很快成熟,并進一步分化為肝細胞或膽管上皮細胞,因為此期的肝臟上皮細胞其具有向這兩種肝實質細胞雙向分化的潛能,所以又稱肝母細胞。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠胚胎肝母采用膠原酶消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠胚胎肝母經PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代左右
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
小鼠纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)試劑盒 96T/48T
小鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物(PAP)試劑盒 96T/48T
小鼠纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)試劑盒 96T/48T
小鼠纖連蛋白(FN)試劑盒 96T/48T
小鼠胃泌素(GT)試劑盒 96T/48T
Human phospholipase A2 (PL-A2) ELISA Kit 人0脂酶A2(PL-A2)試劑盒
HumanAmylaseELISAKit 人(Amylase)試劑盒 96T/48T 進口分裝
ChickenIerleukin17,IL-17試劑盒雞白介素17(IL-17)試劑盒規格:96T/48T
載玻片細胞FSH-BETA蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseGlycogenphosphorylaseII,GP-IIELISAKit小鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)試劑盒規格:96T/48T
PerCP-Cy5.5標記人CD64單克隆抗體
賴特異性去甲基酶5B 抗體
PLK1重組小鼠 PLK1 / PLK-1 蛋白 Protein
RNA結合基元蛋白20(RBM20)重組蛋白 Recombinant RNA Binding Motif Protein 20 (RBM20)
IZUMO1重組人 IZUMO1 蛋白 Protein
CDK16 Protein Human 重組人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 蛋白 (GST 標簽)
IL12A Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 IL12A / NKSF1 蛋白 (Fc 標簽)
泛素(Ub)重組蛋白 Recombinant Ubiquitin (Ub)
CDK16 Protein Human 重組人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 蛋白 (GST 標簽)
PTPN11重組小鼠 SHP2 / PTPN11 蛋白 Protein
EFNA5 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白
PRKAR1A重組人 PRKAR1A / PRKAR1 / PKR1 蛋白 Protein
大鼠胚胎肝母細胞兔子內皮抑素(ES)ELISA 試劑盒
People leils binding type AFP / AFP varia 1 (AFP-L1) ELISA kit E 人小扁結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體1(AFP-L1)試劑盒E
Humankappaimmunoglobulinlightchain,κ-IgLCELISAKit 輕鏈kappa抗體(κ-IgLC)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humandynamin2,DNM2試劑盒人發動蛋白2(DNM2)試劑盒規格:96T/48T
組織N-乙酰轉移酶(NAT)活性比色法定量試劑盒20次
HumanPeussioxin,PTELISAKit人百日咳毒素(PT)試劑盒規格:96T/48T