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產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
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更新時間:2024-10-29
大鼠腦膜細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
腦膜組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7344 |
細胞簡介:
大鼠腦膜分離自腦膜組織;腦膜是顱骨與腦間的隔膜,一共有三層,由外向內(nèi)為硬腦膜、蛛網(wǎng)膜和軟腦膜。腦膜細胞圍繞著大腦,參與中樞神經(jīng)系統(tǒng)的正常發(fā)育,能穩(wěn)定腦軟膜表面的細胞外基質(zhì)、組織放射狀膠質(zhì)細胞網(wǎng)絡(luò)和小腦皮層分層結(jié)構(gòu)。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠腦膜采用消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠腦膜經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
中文名稱 方法 規(guī)格
大鼠髓過氧化物酶特異性抗粒細胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCAIgG)ELISAKit ELISA.
大鼠補體蛋白3(C3)ELISAKit ELISA.
大鼠(AZT)ELISAKit ELISA.
豬白介素18(IL-18)ELISA 試劑盒
Human ai Sa aibody (ai-Sa-Ab) ELISA Kit 人抗Sa抗體(ai-Sa-Ab)試劑盒
Porcineierleukin10,IL-10ELISAKit 豬白介素10(IL-10)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAIRA(Humanai-insulieceptoraibody)ELISAKit人抗胰島素受體抗體
血液尿酸含量直接(TPTZ)比色法定量試劑盒50次
MouseUlasensitivityThyroxine,u-T4ELISAKit小鼠高敏甲狀腺素(u-T4)試劑盒
mRNA前體剪接因子PRPF40B抗體
緊密連接蛋白22抗體
FGFR4重組食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 Protein
MDM2 (urine double minute 2 0.5mgMDM2 (urine double minute 2) 雙微體2癌基因抗原
IL21R重組人 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
AK4 Protein Human 重組人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 蛋白
DDR1 Protein Mouse 重組小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
MDM2 (urine double minute 2 0.5mgMDM2 (urine double minute 2) 雙微體2癌基因抗原
AK4 Protein Human 重組人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 蛋白
FGFR4重組食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 Protein
DDR1 Protein Mouse 重組小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
IL21R重組人 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
大鼠腦膜細胞豚鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA 試劑盒
Rat angiotensin conveing enzyme (ACE) ELISA Kit 大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)試劑盒
Humanglomerularbasememembraneaibogy,GBMELISAKit 人抗腎小球基底膜抗體(GBM)試劑盒 進口分裝
HumanCyclophosphamide,CTX試劑盒人環(huán)0酰胺(CTX)試劑盒
組織HCV(HEPATITISVIRUSC)病毒定量PCR擴增試劑盒20次
HumanPoliomyelitisVirus,PV-IgGELISAKit人脊髓灰質(zhì)病毒IgG(PV-IgG)試劑盒
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