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更新時間:2024-10-29
大鼠骨髓單個核細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
骨髓 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 圓形 | YS-01X7743 |
細胞簡介:
大鼠骨髓單個核分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質間的網眼中,是一種海綿狀的組織,能產生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓單個核細胞是骨髓中具有單個核的細胞,包括淋巴細胞和單核細胞。注意這里是(mononuclear cell)單個核細胞,而不是(Monocyte)單核細胞。單個核細胞的體積、形態和比重與骨髓其他細胞不同,利用一定比例聚蔗糖和鈉形成的等滲溶液作密度梯度離心,使一定密度的細胞按相應密度梯度分布,可將各種血細胞與單個核分離。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠骨髓單個核采用取骨髓、通過密度梯度離心法制備而來制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠骨髓單個核經過檢測,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 半貼壁半懸浮
細胞形態 圓形
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
植物C(VC)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
植物B6(VB6)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
植物B12(VB12)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
植物A(VA)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬(EPI)ELISA 試劑盒
Human kallikrein 11 (KLK 11) ELISA Kit 人11(KLK 11)試劑盒
GuineaPigmonocytechemotacticprotein4,MCP-4ELISAkit 豚鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforANG(Humanangiostatin)ELISAKit人血管抑素/血管穩定蛋白
血液(CO2)濃度酶偶聯反應比色法定量試劑盒20次
PorcineEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit豬內皮型合成酶(eNOS)試劑盒
4號染色體開放閱讀框3抗體
蛋白質精亞型3抗體
FABP4重組小鼠 FABP4 / ALBP / A-FABP / AFABP 蛋白 (His 標簽) Protein
過氧蛋白同源物(PXDN)重組蛋白 Recombinant Peroxidasin Homolog (PXDN)
GPHA2重組人 GPHA2 / Glycoprotein hormone alpha 2 蛋白 Protein
ADRBK1 Protein Human 重組人 GRK2 / ADRBK1 蛋白 (His & GST 標簽)
IL22RA1 Protein Canine 重組狗 IL22RA1 / IL22R 蛋白 (His 標簽)
過氧蛋白同源物(PXDN)重組蛋白 Recombinant Peroxidasin Homolog (PXDN)
ADRBK1 Protein Human 重組人 GRK2 / ADRBK1 蛋白 (His & GST 標簽)
FABP4重組小鼠 FABP4 / ALBP / A-FABP / AFABP 蛋白 (His 標簽) Protein
IL22RA1 Protein Canine 重組狗 IL22RA1 / IL22R 蛋白 (His 標簽)
GPHA2重組人 GPHA2 / Glycoprotein hormone alpha 2 蛋白 Protein
大鼠骨髓單個核細胞小鼠抗內皮細胞抗體(AECA)ELISA 試劑盒
Rat ai thyroid peroxidase aibody (TPO-Ab) ELISA Kit 大鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)試劑盒
Humancytoplasmicimmunoglobulin,CIgELISAKit 人胞漿免疫球蛋白(CIg)試劑盒 進口分裝
HumanAngiopoietin2,ANG-2試劑盒人血管生成素2(ANG-2)試劑盒
植物脯羥化酶(prolilhydroxylase)活性比色法定量試劑盒20次
Lensculinarisagglinin,LCAELISAKit扁豆凝集素(LCA)試劑盒
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。