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廠商性質:經銷商
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更新時間:2024-10-29
大鼠肝星狀細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
肝臟組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7166 |
細胞簡介:
大鼠肝星形分離自肝臟組織;肝臟是身體內以代謝功能為主的一個器官,并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質的合成等作用;肝臟也制造消化系統中之膽汁。肝臟是機體內臟里最大的器官,位于機體中的腹部位置,在右側橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機體消化系統中最大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態結構:肝臟位于右上腹,隱藏在右側膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復蓋,僅在腹上區、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。肝星形細胞(HSC)又名肝貯脂細胞、維生素A貯存細胞、竇周細胞、Ito細胞等,是肝臟細胞外基質的主要來源。HSC在激活后可進一步轉化為肌成纖維細胞樣細胞,各種可導致肝纖維化的因素均將HSC作為最終靶細胞。正常情況下,HSC處于靜止狀態,當肝臟發生炎癥反應或受到機械刺激等損傷時,HSC的表型由靜止型轉變為激活型,激活的HSC可通過增生和分泌細胞外基質參與肝纖維化的形成及肝內結構的重建,此過程也是肝纖維化的中心環節。肝星形細胞分布于肝臟的Disse間隙內,是合成、分泌細胞外基質的主要來源,在肝纖維化的發生中處于最重要地位。肝星形細胞是肝臟的間充質細胞,約占肝臟細胞總數的8%-13%。作為肝臟合成細胞外基質的主要細胞群,肝星形細胞不僅能分泌蛋白多糖、糖蛋白等細胞外基質成分,合成一定量的膠原酶以維持正常的基底膜結構,還能通過其突起的收縮參與肝竇的微循環調節。此外,肝星形細胞能通過合成肝細胞生長因子、胰島素樣生長因子、表皮生長因子等促進肝細胞增殖和肝再生。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠肝星形采用混合酶灌流消化、低速離心、密度梯度離心制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠肝星狀經α-SMA、Desmin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態最佳
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
豬白介素1β(IL-1β)ELISAKit ELISA.
豬白介素18(IL-18)ELISAKit ELISA.
中文名稱 方法 規格
豬白血病抑制因子受體(LIFR)ELISAKit ELISA.
豬端粒酶(TE)ELISA 試劑盒
Human metallothionein (MT) ELISA Kit 人金屬硫蛋白(MT)試劑盒
PorcineBcl-2AssaciatedXprotein,BAXELISAKit 豬Bcl-2相關X蛋白(BAX)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAlpha2-AP(MouseAlpha2-Aiplasmin)ELISAKit小鼠α2抗纖溶酶
血液(lithium)酶連續循環反應比色法定量試劑盒20次
Nasoniaviipennisvitellogenin,VtgELISAKit蝶蛹金小蜂卵黃蛋白原(vtg)試劑盒
13號染色體開放閱讀框12抗體
促腎上腺皮質激素ACTH(18-39)抗體
CD2重組大鼠 CD2 蛋白 Protein
Fut4/CD15/SSEA-1(Stage-specific embryonic surface antigen 1 0.5mgFut4/CD15/SSEA-1(Stage-specific embryonic surface antigen 1) 階段特異性胚胎表面抗原-1抗原
PARK7重組人 PARK7 / DJ-1 蛋白 (His 標簽) Protein
AMPK Protein Human 重組人 AMPK (G1/B2/A1) Heterotrimer 蛋白
ICAM2 Protein Mouse 重組小鼠 ICAM-2 / CD102 蛋白
Fut4/CD15/SSEA-1(Stage-specific embryonic surface antigen 1 0.5mgFut4/CD15/SSEA-1(Stage-specific embryonic surface antigen 1) 階段特異性胚胎表面抗原-1抗原
AMPK Protein Human 重組人 AMPK (G1/B2/A1) Heterotrimer 蛋白
CD2重組大鼠 CD2 蛋白 Protein
ICAM2 Protein Mouse 重組小鼠 ICAM-2 / CD102 蛋白
PARK7重組人 PARK7 / DJ-1 蛋白 (His 標簽) Protein
大鼠肝星狀細胞小鼠狂犬病毒抗原(RV/PRV-Ag)試劑盒
Rat a disiegrin and metalloproteinase 8 (ADAM8) ELISA Kit 大鼠解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)試劑盒
Huma-Hglycoprotein,THPELISAKit 人TH糖蛋白(THP)試劑盒 進口分裝
Humanadrenergicalpha-1Areceptor,ADRA1A試劑盒人能a1A受體(ADRA1A)試劑盒
植物F型氫ATP酶(H+-ATPase)活性比色法定量試劑盒20次
MouseActivinA,ACV-AELISAKit小鼠活化素A(ACV-A)試劑盒
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。