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更新時間:2024-10-28
大鼠腸微血管內皮細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
腸組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 內皮細胞樣 | YS-01X7187 |
細胞簡介:
大鼠腸微血管內皮分離自腸道組織;腸道指的是從胃幽門至的消化管。腸是消化管中最長的一段,也是功能最重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產物的吸收都是在小腸內進行的,大腸主要濃縮食物殘渣,形成糞便,再通過直腸經排出體外。腸道堪稱身體最勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足夠的養分,其實它的功能還遠不止此——它還是機體內最大的微生態系統。微血管是極細微的血管,管徑平均為6-9μm,連于動、靜脈之間,互相連接成網狀。微血管壁薄,管徑較小,血流很慢,通透性大。其功能是利于血液與組織之間進行物質交換。其管壁主要由一層內皮細胞構成,在內皮外面有一薄層結締組織。另外還??梢姷揭环N扁而有突起的細胞貼在微血管的管壁外面,稱為周細胞。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠腸微血管內皮采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠腸微血管內皮經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 內皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
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器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
小鼠脫酶(ID)試劑盒 96T/48T
小鼠褪黑素(MT/MLT)試劑盒 96T/48T
小鼠透明質酸結合蛋白(HABP)試劑盒 96T/48T
小鼠透明質酸(HA)試劑盒 96T/48T
小鼠褪黑素(MT/MLT)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human keratan sulfate (KS) ELISA Kit 人角質素(KS)試劑盒
Humannonmethylatedoligonucleotide,NONELISAKit 人非甲基化寡核苷酸(NON)試劑盒 96T/48T 進口分裝
ChickensecretoryimmunoglobulinA,SIgA試劑盒雞分泌型免疫球蛋白A(SIgA)試劑盒規格:96T/48T
載玻片細胞PARP蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseFibronectin,FNELISAKit小鼠纖連蛋白(FN)試劑盒規格:96T/48T
粘膜細胞粘附分子1抗體
SYCE1蛋白抗體
PRLR重組小鼠 PRLR / Prolactin Receptor 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
BMP4(bone morphogenetic protein 4 0.5mgBMP4(bone morphogenetic protein 4) 骨形態發生蛋白4(抗原)
KIT重組人 KIT / c-KIT / CD117 蛋白 (aa 540-972, His & GST 標簽) Protein
CFD Protein Human 重組人 Adipsin / Complement Factor D / CFD 蛋白
CSF2RB Protein Rat 重組大鼠 CD131 / CSF2RB / IL3RB / IL5RB 蛋白 (Fc 標簽)
BMP4(bone morphogenetic protein 4 0.5mgBMP4(bone morphogenetic protein 4) 骨形態發生蛋白4(抗原)
CFD Protein Human 重組人 Adipsin / Complement Factor D / CFD 蛋白
PRLR重組小鼠 PRLR / Prolactin Receptor 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
CSF2RB Protein Rat 重組大鼠 CD131 / CSF2RB / IL3RB / IL5RB 蛋白 (Fc 標簽)
KIT重組人 KIT / c-KIT / CD117 蛋白 (aa 540-972, His & GST 標簽) Protein
大鼠腸微血管內皮細胞小鼠脫氫表雄酮酯(DHEA-S)ELISA 試劑盒
One Japanese encephalitis aibody IgG (JE IgG) ELISA Kit 人流行性乙型腦抗體IgG(JE IgG)試劑盒
HumanBcellreceptor,BCRELISAKit 人B細胞受體(BCR)試劑盒 96T/48T 進口分裝
ChickenNuclearfactor-kappaB,NF-κB試劑盒雞核因子κB(NF-κB)試劑盒規格:96T/48T
載玻片細胞P38蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
mousefollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit小鼠促卵泡素(FSH)試劑盒規格:96T/48T
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。