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更新時間:2024-10-28
大鼠腸成纖維細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
腸 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7856 |
細胞簡介:
大鼠腸成纖維分離自腸道組織;腸道指的是從胃幽門至的消化管。腸是消化管中最長的一段,也是功能最重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產物的吸收都是在小腸內進行的,大腸主要濃縮食物殘渣,形成糞便,再通過直腸經排出體外。腸道堪稱身體最勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足夠的養分,其實它的功能還遠不止此——它還是機體內最大的微生態系統。各種哺乳動物腸的結構和功能基本相似。腸壁結構一般分4層,由外向內依次為:漿膜層(腹腔臟層),平滑肌層,黏膜下層和黏膜層。平滑肌層的外層為縱行肌纖維,內層為環形肌纖維,兩者都以螺旋式走行,它們以收縮和舒張來完成腸的機械性消化。黏膜層又分為3層:靠近黏膜下層的是一層平滑肌,稱為黏膜肌層。其次為結締組織,又稱為固有層。最后面向腸腔的是一層柱狀上皮細胞構成的黏膜。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
實驗室分離的大鼠腸成纖維采用膠原酶-聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的大鼠腸成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:成纖維細胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠腸成纖維細胞體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的最佳培養狀態。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
植物草酸氧化酶(OxO)檢測試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
植物25羥基D3(25(OH)D3/25HVD3)檢測試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
魚脫酶3(DIO3)ELISA檢測試劑盒 ELISA 組裝/原裝
魚脫酶2(DIO2)ELISA檢測試劑盒 ELISA 組裝/原裝
植物E(VE)ELISA 試劑盒
Human liver specific lipoprotein aibody (LSP) ELISA Kit 人抗肝特異性脂蛋白抗體(LSP)檢測試劑盒
PorcineCoicosterone,COELISAKit 豬皮質酮/腎上腺酮(CO)檢測試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAFP-L1(Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin1)ELISAKit人小扁結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體1
血液D比色法定量檢測試劑盒20次
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抑癌基因p16/p14/P19抗體
RHOA單克隆抗體
CD164重組大鼠 CD164 / Endolyn 蛋白 Protein
ER-Alpha peptide 雌激素受體(多肽抗原 0.5mgER-Alpha peptide 雌激素受體(多肽抗原)
PRSS27重組人 Pancreasin / Marapsin / PRSS27 蛋白 (His 標簽) Protein
ADAM15 Protein Human 重組人 ADAM15 蛋白 (His 標簽)
ADIPOQ Protein Mouse 重組小鼠 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 蛋白 (His 標簽)
ER-Alpha peptide 雌激素受體(多肽抗原 0.5mgER-Alpha peptide 雌激素受體(多肽抗原)
ADAM15 Protein Human 重組人 ADAM15 蛋白 (His 標簽)
CD164重組大鼠 CD164 / Endolyn 蛋白 Protein
ADIPOQ Protein Mouse 重組小鼠 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 蛋白 (His 標簽)
PRSS27重組人 Pancreasin / Marapsin / PRSS27 蛋白 (His 標簽) Protein
大鼠腸成纖維細胞小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA 試劑盒
Rat apoptosis inducing factor (AIF) ELISA Kit 大鼠凋亡誘導因子(AIF)檢測試劑盒
Humanα-L-iduronidase,IDUAELISAKit 人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)檢測試劑盒 進口分裝
CLIAKitfor(MouseGasoiestinalcancerMarker-CA199)ELISAKit小鼠胃腸癌標志物CA199
飲料乙酸激酶法定量檢測試劑盒20次
MouseIerleukin6,IL-6ELISAKit小鼠白介素6(IL-6)檢測試劑盒
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