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廠商性質:經銷商
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更新時間:2024-11-05
大鼠關節囊成纖維細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
關節囊 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X8234 |
細胞簡介:
大鼠關節囊成纖維分離自關節囊組織;關節囊(articular capsule)是由結締組織構成的膜囊,附著于關節的周圍,密封關節腔。關節囊的壁共有兩層:外層為纖維層;內層為滑膜層。纖維層實際上是一個連結骨的骨膜向另一骨骨膜的移行。纖維層厚而堅韌,由致密結締組織構成,含有豐富的血管和神經。其淺層纖維多呈縱行排列;深層纖維主要為環行纖維。纖維層的厚薄,各個關節不相同,即是在同一關節中,各部也不一致一般在運動范圍小的或是負重較大的關節中,都較厚而緊張,相反,于運動靈活的關節,則較薄而松弛。有的關節囊的部分纖維囊缺如,僅一層滑膜層;有的部分明顯增厚,形成韌帶。滑膜層薄而柔潤,是由疏松結締組織構成,襯在纖維層內面,周緣附著在關節軟骨的邊緣。它朝向關節腔的內面光而發亮,此面上蓋有一層內皮細胞。滑膜向關節腔分泌滑液,滑液是稍粘稠而透明的液體,可減少關節中相連骨的摩擦,是一種滑潤劑。滑膜表面可形成絨毛或皺襞突入關節腔內。有時滑膜層可以穿過纖維層呈囊狀向外膨出,形成滑膜囊,常位于肌腱與骨面之間。有時滑膜層突出不明顯,僅呈深窩狀,稱為囊狀隱窩。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來;成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
方法簡介:
實驗室分離的大鼠關節囊成纖維采用混合酶消化結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的大鼠關節囊成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基:基礎培養基,含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠關節囊成纖維體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的優良培養狀態。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
小鼠低氧誘導因子1α(mouse HIF-1α) 作用: ELISA 規格: 進口分裝
小鼠熱休克蛋白60(mouse Hsp-60) 作用: ELISA 規格: 進口分裝
小鼠組胺(mouse HIS) 作用: ELISA 規格: 進口分裝
小鼠肝生素(mouse HGF) 作用: ELISA 規格: 進口分裝
小鼠結合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human papilloma virus aibody IgG (HPV-IgG) ELISA Kit 人狀瘤病毒抗體IgG(HPV-IgG)試劑盒
Huma-cellacelymphoblasticleukemiaaigen,TALLA-1ELISAKit 人T細胞急性淋巴母細胞白血病相關抗原(TALLA-1/CD231)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-cardiolipinaibodyIgM,ACA-IgM試劑盒人抗心0脂抗體IgM(ACA-IgM)試劑盒規格:96T/48T
植物黑色素含量比色法定量試劑盒20次
Humanα-enolase,αENOLELISAKit人α烯醇化酶(αENOL)試劑盒規格:96T/48T
胞漿蛋白SH3GL3抗體
磷酸化14-3-3E蛋白抗體
CSF3R重組人 G-CSFR / CD114 / CSF3R 蛋白 (Fc 標簽) Protein
神經肽S(NPS)重組蛋白 Recombinant Neuropeptide S (NPS)
PGK2重組人 Phosphoglycerate Kinase 2 / PGK2 蛋白 Protein
EFNA3 Protein Human 重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
神經肽S(NPS)重組蛋白 Recombinant Neuropeptide S (NPS)
EFNA3 Protein Human 重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白
CSF3R重組人 G-CSFR / CD114 / CSF3R 蛋白 (Fc 標簽) Protein
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
PGK2重組人 Phosphoglycerate Kinase 2 / PGK2 蛋白 Protein
大鼠關節囊成纖維細胞大鼠白細胞介素18(IL-18)試劑盒 ,英文名: IL-18 ELISA Kit
Mouse macrophage inflammatory protein 5 (MIP-5) ELISA Kit 小鼠巨噬細胞性蛋白5(MIP-5)試劑盒
MouseLebtospiraIgGELISAKit 小鼠鉤端IgG(Lebtospira)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanNOD-likereceptor9,NLRELISAKit人NOD樣受體
同位素真菌/酵母細胞蛋白核酸結合凝膠遷移電泳分析試劑盒20次
ELISAKitsLR大鼠可溶性瘦素受體
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
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