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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

小鼠胚胎肢芽間充質(zhì)干細(xì)胞

產(chǎn)品簡介:

小鼠胚胎肢芽間充質(zhì)干細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:B16-F10小鼠黑色素瘤細(xì)胞 Kasumi-1 (人急性原粒細(xì)胞白血病細(xì)胞) 兔真皮毛乳頭細(xì)胞 乙酰化組蛋白H2B K12抗體 小鼠結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞 P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小鼠骨髓瘤細(xì)胞) 人子宮平滑肌細(xì)胞 轉(zhuǎn)錄因子ELF1抗體

產(chǎn)品型號:

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問量:895

更新時間:2024-11-07

產(chǎn)品特性Product characteristics

小鼠胚胎肢芽間充質(zhì)干細(xì)胞

小鼠胚胎肢芽間充質(zhì)干細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號

胚胎

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

成纖維細(xì)胞樣

YS-01X8520

細(xì)胞簡介:

小鼠胚胎肢芽間充質(zhì)干分離自胚胎肢芽;胚胎肢芽存在于兩棲類以上的大多數(shù)脊椎動物胚胎中,在四肢發(fā)生的初期階段,在身體兩側(cè)有呈芽狀的突起,內(nèi)部是中胚層側(cè)板的體壁板垱厚形成,表面有表皮覆蓋。在這個中胚層區(qū)肢芽迅速伸長,不久,在其前端即見有指的突起。在此時期間,其內(nèi)部的中胚層分化成軟骨、肌肉等。這些分化組織,在將肢芽作分離培養(yǎng)的時候也可以獲得。根據(jù)對兩棲類的有尾類的研究,作為肢原基各部的胚發(fā)能力,肢芽物質(zhì)的大部分是位于背半部,而前半部主要參與基部形成,后半部參與前端的形成。在實驗上,即使將肢的原基分成二半,每一半調(diào)整好都可形成基本上近于正常形態(tài)的肢體,而且肢體各軸的極性和側(cè)性也逐漸決定。間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)是屬于中胚層的一類多能干細(xì)胞,主要存在于結(jié)締組織和器官間質(zhì)中,是具有高度自我更新和多向分化潛能的干細(xì)胞;這些細(xì)胞可以通過分裂維持自身細(xì)胞的特性和數(shù)量,并在特定條件下轉(zhuǎn)變成為一種或多種構(gòu)成機(jī)體組織或器官的細(xì)胞,從而在組織修復(fù)等方面發(fā)揮積極作用。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗;

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。

方法簡介:

實驗室分離的小鼠胚胎肢芽間充質(zhì)干采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

實驗室分離的小鼠胚胎肢芽間充質(zhì)經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

傳代特性:可傳2-3

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%CO25%

小鼠胚胎肢芽間充質(zhì)干體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

小鼠胚胎肢芽間充質(zhì)干細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

  ② 消化培養(yǎng)法

  ③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

  ④器官培養(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

小鼠胚胎肢芽間充質(zhì)干細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

土壤無機(jī)0S-PHOS)含量測試盒   可見分光光度法   50/48

土壤總0/有機(jī)0/無機(jī)0含量測試盒   可見分光光度法   50/48

土壤脲酶(UE)測試盒   可見分光光度法   50/24

土壤多酚氧化酶(PPO)測試盒   可見分光光度法   50/48

JM4蛋白抗體

宮頸癌原癌基因2抗體

PDCD1LG2重組大鼠 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

C-Peptide( C-PEP 0.5mgC-Peptide( C-PEP ) C-(C)

LGALS8重組人 Galectin-8 / LGALS8 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

IFNA4 Protein Human 重組人 IFNα4 / IFNa4 / Interferon alpha-4 蛋白

TNFRSF17 Protein Mouse 重組小鼠 TNFRSF17 / B僀?僀

C-Peptide( C-PEP 0.5mgC-Peptide( C-PEP ) C-(C)

IFNA4 Protein Human 重組人 IFNα4 / IFNa4 / Interferon alpha-4 蛋白

PDCD1LG2重組大鼠 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

TNFRSF17 Protein Mouse 重組小鼠 TNFRSF17 / BCMA 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

LGALS8重組人 Galectin-8 / LGALS8 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

小鼠25羥基3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA pcr檢測試劑盒

Rat fibronectin (FN) ELISA Kit 大鼠纖連蛋白(FN)試劑盒

HumanUlaSensitivegrowthhormone,US-GHELISAKit 人超敏生長激素(US-GH)pcr檢測試劑盒分裝

Humanconnectivetissue-activatingpeptide,CTAPⅢ試劑盒人結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAP)試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織CDK6/CYCD1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20

Humanproteiyrosinephosphatase,PTP/PTPaseELISAKit人蛋白酪0酸酶(PTP/PTPase/CD148)試劑盒規(guī)格:96T/48T

小鼠胚胎肢芽間充質(zhì)干細(xì)胞大鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)試劑盒 ,英文名: PF/PFP ELISA Kit

Mouse 6 keto prostaglandin F1a (6-keto-PGF1a) ELISA Kit 小鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)試劑盒

ELISA 小鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(mouse CF) 分裝

CLIAKitforLF/LTF(RabbitLactoferrin)ELISAKit兔乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白

通用型HRP-DAB底物顯色試劑盒10

ELISAKitMMP11基質(zhì)金屬蛋白酶11


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