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更新時間：2024-11-07

小鼠子宮韌帶成纖維細胞

商品屬性：

細胞簡介：

小鼠子宮韌帶成纖維分離自子宮韌帶組織，子宮韌帶是子宮附件的一部分，其主要功能是固定子宮，子宮韌帶共包括4條韌帶，分別是：子宮主韌帶、子宮闊韌帶、子宮圓韌帶、和骶子宮韌帶。子宮主韌帶為子宮闊韌帶下部兩層腹膜之間的一些纖維結締組織束和平滑肌纖維，較強韌，將子宮頸陰道上部連于骨盆側 壁，它是維持子宮頸正常位置，防止其向下脫垂的主要結構。骶子宮韌帶由平滑肌和結締組織構成，起自子宮頸陰道上部后面，向后繞過直腸的兩側，止于骶骨前面。此韌帶表面蓋以腹膜，形成弧形皺襞為直腸子宮襞。此韌帶向后上牽引子宮頸，并與子宮圓韌帶共同維持子宮的前傾前屈位。子宮闊韌帶位于子宮兩側的雙層腹膜皺襞，呈翼狀，由覆蓋子宮前后壁的腹膜自子宮側緣向兩側延伸達盆壁而成，可限制子宮向兩側傾倒。闊韌帶分為前后兩葉，其上緣游離，內2/3部包 裹輸卵管(傘部無腹膜遮蓋)，外l/3部移行為骨盆漏斗韌帶(infundibulopelvic　ligament)或稱卵巢懸韌帶(suspensory ligament of ovary)，卵巢動靜脈由此穿行。在輸卵管以下、卵巢附著處以上的闊韌帶稱輸卵管系膜，其中有結締組織及中腎管遺跡。卵巢與闊韌帶后葉相接處稱卵巢系膜。卵巢內側與宮角之間的闊韌帶稍增厚稱卵巢固有韌帶或卵巢韌帶。在宮體兩側的闊韌帶中有豐富的血管、神經、淋巴管及大量疏松結締組織稱宮旁組織。子宮動靜脈和輸尿管均從闊韌帶 基底部穿過。子宮圓韌帶為一對長條狀圓索，由平滑肌和結締組織構成。起于子宮外側緣，輸卵管子宮口的前下方。在子 宮闊韌帶前層覆蓋下，走向前外側，經過腹股溝管，終止于陰阜及大上部之中。為維持子宮前傾位的主要結構。

方法簡介：

實驗室分離的小鼠子宮韌帶成纖維采用 - 膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

實驗室分離的小鼠子宮韌帶成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

培養基：基礎培養基，含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳2-3代左右

消化液：0.25%

培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠子宮韌帶成纖維體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。

細胞傳代及凍存：

原代細胞的培養方法一般有以下4種：

　　① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

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原代細胞的培養條件：

　　一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養

　　1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；

　　2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；

　　3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；

　　4、 胎牛血清濃度為10%-80%

　　5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；

　　6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發生脫落，漂浮；

　　7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；

　　8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。

　　二、懸浮細胞培養

　　1、原代培養時要盡量去除紅細胞；

　　2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行；

　　3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；

　　4、長期培養時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；

　　5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；

　　6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行