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更新時間:2024-11-05
大鼠髂動脈內皮細胞大
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
髂動脈 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 內皮細胞樣 | YS-01X8253 |
細胞簡介:
大鼠髂動脈內皮分離自髂動脈組織;髂總動脈位于機體的盆腔,大鼠的髂總動脈有兩條,也就是臨床上左右兩條分支,它是由腹部最主要的動脈演化而來,由腹部的腹主動脈沿著機體的脊柱方向向下進行,到達第4腰椎后開始分成兩支,這就是左右髂總動脈。動脈是介于心室與毛細血管之間的管道,它接近心室的部分,管徑大,管壁較厚。經過反復分支,管徑逐漸變小,管壁變薄,最后形成與毛細血管構造相似的毛細血管前小動脈,與毛細血管相接。動脈的管徑大小和管壁的厚薄,雖相差很大,但構造上均有共同之處。一般均由3層膜組成,最內層稱為內膜,由內皮及縱行排列的結締組織構成;中間的一層稱為中膜,由環形排列的組織構成;最外的一層叫外膜,由縱行排列的結締組織構成。動脈內皮細胞是覆蓋在主動脈內面的單層細胞,可分泌一系列血管活性物質而保持血管穩態,當其受到炎癥或其它因素刺激后穩態被破壞而導致一些心血管疾病的發生。因此,動脈內皮細胞已成為研究心血管疾病發病機制及治療藥物的工具。內皮細胞或血管內皮是一薄層的專門上皮細胞,由一層扁平細胞所組成。它形成血管的內壁,是血管管腔內血液及其他血管壁(單層鱗狀上皮)的接口。內皮細胞是沿著整個循環系統,由心臟直至最小的微血管。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
實驗室分離的大鼠髂動脈內皮采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的大鼠髂動脈內皮經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:內皮細胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠髂動脈內皮體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的優良培養狀態。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
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DRD3 receptor(dopamine D3 receptor 0.5mgDRD3 receptor(dopamine D3 receptor) 多巴胺受體-D3抗原
ERBB2 Protein Human 重組人 HER2 / ErbB2 / CD340 (676-1255) 蛋白 (His & GST 標簽)
EPHA7重組大鼠 EphA7 / EHK3 蛋白 Protein
TNFRSF10B Protein Mouse 重組小鼠 TRAIL R2 / CD262 / TNFRSF10B 蛋白 (His & Fc 標簽)
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CLIAKitforiNOS(Humaninducibleniicoxidesyhase)ELISAKIT人誘導型合成酶
通用型甘薯黑斑病(Ceratocystisfimbriata)試劑盒20次
ELISAKitPROGR大鼠孕同受體