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更新時間:2024-11-05
大鼠視網膜星形膠質細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
視網膜 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X8259 |
細胞簡介:
大鼠視網膜星形膠質分離自視網膜組織;視網膜居于眼球壁的內層,是一層透明的薄膜。視網膜由色素上皮層和視網膜感覺層組成,兩層間在病理情況下可分開,稱為視網膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連,由色素上皮細胞組成,它們具有支持和營養光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網膜分為10層,由外向內分別為:色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內顆粒層、內叢狀層、神經節細胞層、神經纖維層、內界膜。星形膠質細胞為中樞神經系統中的伙伴神經元提供多種支持功能,如發育過程中的神經引導、終生的營養和代謝支持。大量研究表明,星形膠質細胞是中樞神經系統中功能最多樣的細胞群之一。腦卒中和其他損傷時,正常星形膠質細胞功能受損可嚴重影響神經元存活。視網膜星形膠質細胞對神經元的穩態和視網膜的功能至關重要。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
實驗室分離的大鼠視網膜星形膠質采用酶消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的大鼠視網膜星形膠質經GFAP免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基:基礎培養基,含FBS、EGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:梭形、多角形
傳代特性:可傳3-5代左右;3代以內狀態優良
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠視網膜星形膠質體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的優良培養狀態。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
小鼠白三烯B4(LTB4)試劑盒 96T/48T
小鼠白介素9(IL-9)試劑盒 96T/48T
小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)試劑盒 96T/48T
小鼠白介素7(IL-7)試劑盒 96T/48T
小鼠基質金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat soluble leptin receptor (sLR) ELISA Kit 大鼠可溶性瘦素受體(sLR)試劑盒
Humanadaptormoleculeapoptoticpeptidaseactivatingfactor1,APAF1ELISAKit 人銜接蛋白酶活化因子1(APAF1)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-hepatitisDvirusaibody,ai-HDV試劑盒人抗丁型肝病毒抗體(ai-HDV)試劑盒規格:96T/48T
植物0脂酶D1(PhospholipaseD1)活性比色法定量試劑盒20次
HumanVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAKit人血管內皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)試劑盒規格:96T/48T
APC標記人CD83單克隆抗體
錨定蛋白樣蛋白1抗體
BSG重組人 CD147 / EMMPRIN / Basigin 蛋白 (Fc 標簽) Protein
抗酸性0酸酶(ACP5)重組蛋白 Recombinant Acid Phosphatase 5, Tartrate Resistant (ACP5)
RAB27B重組人 RAB27B 蛋白 Protein
EPHA7 Protein Human 重組人 EphA7 / EHK3 蛋白
HA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 (A/California/7/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
抗酸性0酸酶(ACP5)重組蛋白 Recombinant Acid Phosphatase 5, Tartrate Resistant (ACP5)
EPHA7 Protein Human 重組人 EphA7 / EHK3 蛋白
BSG重組人 CD147 / EMMPRIN / Basigin 蛋白 (Fc 標簽) Protein
HA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 (A/California/7/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
RAB27B重組人 RAB27B 蛋白 Protein
大鼠視網膜星形膠質細胞大鼠白介素2可溶性受體β鏈(sIL-2Rβ)試劑盒 ,英文名: sIL-2Rβ ELISA Kit
Mouse ierleukin 3 (IL-3) ELISA Kit 小鼠白介素3(IL-3)試劑盒
ELISA 小鼠干擾素-r(mouse IFN-r) 進口分裝
CLIAKitforINH-A(MouseInhibin)ELISAKit小鼠抑制素A
通用型元素比色法定量試劑盒20次
ELISAKitFT4大鼠游離甲狀腺素