服務熱線
021-59989018
產品簡介:
產品型號:
廠商性質:經銷商
訪問量:779
更新時間:2024-11-05
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業應用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
產品名稱:大鼠外周血樹突狀細胞(成熟DC細胞)
組織來源:外周血
產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶
培養信息:
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:半貼壁半懸浮
細胞形態:圓形,樹突狀
傳代特性:屬于高度分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠外周血樹突狀(成熟DC細胞)體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的優良培養狀態。
細胞簡介:
大鼠外周血DC分離自外周血,由外周血單核細胞誘導而成的;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。樹突狀細胞分為成熟樹突狀細胞和未成熟樹突狀細胞,典型的未成熟樹突狀細胞呈半貼壁生長,在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串樣集落,細胞大而形態不規則,表面皺褶多,亦可見少量短刺狀突,胞內細胞器豐富并可見吞噬泡,具有較強的遷移能力,伴隨有部分未誘導成的單核細胞,貼壁形態多樣。而成熟的樹突狀細胞由未成熟DC進一步經TNFα、LPS等誘導而成,多數呈懸浮生長, 細胞呈圓形,細胞體積進一步增大,表面大量粗細不等的樹枝樣突起(高倍鏡或者電鏡下可觀察到 ),伴隨少量貼壁未成熟細胞或者單核細胞。未成熟DC細胞長時間培養也可能導致自發分化成熟。DC細胞尚無特異性細胞表面分子標志,主要通過形態學、組合性細胞表面標志、在混合淋巴細胞反應中能激活初始T細胞等特征進行鑒定。其中成熟樹突狀細胞表面高表達主要組織相容性復合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子,進而激活T淋巴細胞,誘導免疫應答,處于啟動、調控、并維持免疫應答的中心環節;未成熟樹突狀細胞具有很強的抗原攝取加工能力,但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細胞活化、增殖產生免疫應答,不能激活T細胞的第二信號,可導致T細胞無能,從而誘導免疫低反應或抗原免疫特異性耐受。未成熟樹突狀細胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達較低,一般在30%以下。
方法簡介:
實驗室分離的大鼠外周血成熟DC采用密度梯度離心法分離外周血單個核細胞、培養過程添加細胞因子誘導而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的大鼠外周血樹突狀(成熟DC細胞)經CD86免疫熒光鑒定、細 胞 形態等綜合鑒定,純度可達80%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養步驟:
一、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中),培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
二、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
a)、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加5ml以上含10%血清的培養基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養液,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養液的新皿中或者瓶中。
b)、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補加1-2ml培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產品:
小鼠表皮生長因子(mouse EGF) 作用: ELISA 規格: 進口分裝
小鼠表皮生長因子受體(mouse EGF R) 作用: ELISA 規格: 進口分裝
小鼠內皮素-1(mouse Endothelin-1) 作用: ELISA 規格: 進口分裝
小鼠噬酸性粒細胞趨化因子(mouse Eotaxin) 作用: ELISA 規格: 進口分裝
小鼠基質金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human epithelial neuophil activating peptide 78 (ENA-78/CXCL5) ELISA Kit 人上皮中性粒細胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)試劑盒
HumanleukocyteaigenA,HLA-AELISAKit 人類白細胞抗原A(HLA-A)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-hepatitisAvirusIgGaibody,ai-HAV試劑盒人抗甲型肝病毒IgG抗體(ai-HAV)試劑盒規格:96T/48T
植物0酸葡萄糖變位酶(phosphoglucomase;PGM)活性光譜法定量試劑盒20次
Humanvimein,VIMELISAKit人波形蛋白(VIM)試劑盒規格:96T/48T
CD13重組兔單克隆抗體
內皮分化相關因子1抗體
EPCAM重組食蟹猴 / 恒河猴 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 (Fc 標簽) Protein
IL-1 Beta(Interleukin-1 Beta 0.5mgIL-1 Beta(Interleukin-1 Beta) 白介素1β(白細胞介素-1β)(多肽抗原)
CSNK1A1重組人 CSNK1A1 / CKI-alpha / CK1 蛋白 (GST 標簽) Protein
EPHA3 Protein Human 重組人 EphA3 蛋白
CD84 Protein Mouse 重組小鼠 CD84 蛋白
IL-1 Beta(Interleukin-1 Beta 0.5mgIL-1 Beta(Interleukin-1 Beta) 白介素1β(白細胞介素-1β)(多肽抗原)
EPHA3 Protein Human 重組人 EphA3 蛋白
EPCAM重組食蟹猴 / 恒河猴 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 (Fc 標簽) Protein
CD84 Protein Mouse 重組小鼠 CD84 蛋白
CSNK1A1重組人 CSNK1A1 / CKI-alpha / CK1 蛋白 (GST 標簽) Protein
大鼠外周血樹突狀細胞(成熟DC細胞)大鼠白介素28A(IL-28A)試劑盒 ,英文名: IL-28A ELISA Kit
Mouse ierleukin 9 (IL-9) ELISA Kit 小鼠白介素9(IL-9)試劑盒
ELISA 小鼠IgA(mouse IgA) 進口分裝
CLIAKitforILK-1(Humaniegrin-linkedkinase1)ELISAKit人整合素連接激酶1
通用型胱(cystine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
ELISAKitOSM大鼠抑瘤素M
收到細胞如何處理?
1、首先,觀察細胞培養瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象。若有,請拍照,并及時與技術支持聯系(所拍照片將作為后續服務依據)。
2、用75%酒精擦拭細胞培養瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養瓶蓋,將細胞置于細胞培養箱內靜置培養2-4小時,以便穩定細胞狀態。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細胞形態、所用基礎培養基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(所拍照片將作為后續服務依據);建議細胞傳代培養后,定期拍照、記錄細胞生長狀態。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養瓶內培養基,預留5ml左右繼續培養,直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內,1200rpm離心5min,離心后上清培養基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養瓶內培養,補加培養基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續培養,直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作
下一篇:無醇蘇木素染液