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更新時間:2024-11-05
大鼠直腸黏膜上皮細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
直腸 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X8274 |
細胞簡介:
大鼠直腸黏膜上皮分離自直腸組織;直腸為大腸的未段,位于小骨盆內。上端平第3骶椎處接續乙狀結腸,沿骶骨和尾骨的前面下行,穿過盆膈,下端以門而終。直腸上端的大小似結腸,其下端擴大成直腸壺腹,是糞便排出前的暫存部位,最下端變細接管。直腸在盆腔內的位置與骶椎腹面關系密切,與骶椎有相同的曲度。直腸周圍多脂肪、無縱帶,位于膀胱和生殖器官的背側。直腸的動脈血供主要是來自腸系膜下動脈的直腸上動脈,來自髂內動脈的直腸中動脈和來自髂內動脈的直腸下動脈。腸黏膜上皮細胞是機體內外環境的重要屏障,持續暴露于大量抗原中,也是機體面對病原微生物的第一道防線。因此,腸黏膜上皮細胞除有吸收、分泌和轉運等重要生理功能之外,在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細胞作為首先接觸抗原的細胞,在黏膜免疫反應的起始階段發揮關鍵作用,它決定黏膜免疫反應的發生、性質和強度。
方法簡介:
實驗室分離的大鼠直腸黏膜上皮采用先機械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的大鼠直腸黏膜上皮經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:上皮細胞樣
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠直腸黏膜上皮體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的優良培養狀態。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
突觸核蛋白 英文名稱: Human α Synucleinα 規格: 英文縮寫: α-SYN
血清鐵蛋白 英文名稱: ferritin in serum 規格: 英文縮寫: SF
肺表面活性物質相關蛋白A 英文名稱: Pulmonary surfacta associated protein type A 規格: 英文縮寫: SP-A
β-谷甾醇 英文名稱: β Sitosterol 規格: 英文縮寫: β Sitosterol
小鼠17羥孕酮(17-OHP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat plasminogen activator inhibitor 1 (PAI-1) ELISA Kit 大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)試劑盒
HumanIsoprenalineHydrochloride,iso-HydELISAKit 人異(iso-Hyd)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCoisol試劑盒人(Coisol)試劑盒規格:96T/48T
組織C-KIT激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanproteinkinaseB,PKBELISAKit人蛋白激酶B(PKB)試劑盒規格:96T/48T
DZANK1蛋白抗體
親環蛋白(親環素)40抗體
NTRK2重組狗 TrkB / NTRK2 蛋白 (Fc 標簽) Protein
Nestin 巢蛋白(神經上皮干細胞蛋白 0.5mgNestin 巢蛋白(神經上皮干細胞蛋白)(抗原)
SEMA6A重組人 Semaphorin 6A / SEMA6A 蛋白 Protein
IFNA8 Protein Human 重組人 Interferon alpha-B / IFNA8 蛋白
IL12B Protein Mouse 重組小鼠 IL12B / IL-12B 蛋白
Nestin 巢蛋白(神經上皮干細胞蛋白 0.5mgNestin 巢蛋白(神經上皮干細胞蛋白)(抗原)
IFNA8 Protein Human 重組人 Interferon alpha-B / IFNA8 蛋白
NTRK2重組狗 TrkB / NTRK2 蛋白 (Fc 標簽) Protein
IL12B Protein Mouse 重組小鼠 IL12B / IL-12B 蛋白
SEMA6A重組人 Semaphorin 6A / SEMA6A 蛋白 Protein
大鼠直腸黏膜上皮細胞大鼠白介素2(IL-2)試劑盒 ,英文名: IL-2 ELISA Kit
Mouse 6 galactose sulfatase (Gal-6S) ELISA Kit 小鼠半乳糖6酯酶(Gal-6S)試劑盒
ELISA 小鼠可溶性白介素-2受體(mouse sIL-2R) 進口分裝
CLIAKitforIL-6(HumanIerleukin6)ELISAKIT人白介素6
通用型肌酐(CREATININE)酶連續反應比色法定量試劑盒50次
ELISAKitICA大鼠胰島細胞抗體
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行