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更新時間:2024-11-05
人筋膜成纖維細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
筋膜 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X8297 |
細胞簡介:
人筋膜成纖維分離自筋膜組織;筋膜,解剖結構名。指肌肉的堅韌部分。附于骨節者為筋,包于肌腱外者為膜。是聯絡關節、肌肉,主 司運動的組織。為肝所主,并賴肝血的滋養。筋膜是一類結締組織,結締組織除了筋膜還有其他表現的形式,如腱、韌帶、腱膜和疤痕組織。在不同的地方結締組織也有著不同的名稱:腦和脊髓周圍的是腦膜;骨周圍是骨膜;心臟周圍是心包;腹腔內表面的是腹膜;在皮下層包圍整個身體和封閉肌肉和肌群的叫筋膜。筋膜位于肌肉的表面,分為淺筋膜和深筋膜兩種。(1)淺筋膜位于皮下,又稱皮下筋膜,由疏 松結締組織構成,其內含有脂肪、淺靜脈、皮神經以及淺淋巴結和淋巴管等。脂肪的多少因身體部位、性別和營養狀況不同。臨床常作的皮 下注射,即將藥液注入淺筋膜內。(2)深筋膜 位于淺筋膜深面,又稱固有筋膜,由致密結締組織構成,遍于全身且互相連續。深筋膜包被 肌或肌群、腺體、大血管和神經等形成筋膜鞘。四肢的深筋膜。伸入肌群之間與骨相連,分隔肌群,稱肌間隔。成纖維細胞是結締組織 的主要細胞成分,細胞呈梭形或扁的星狀,具有突起。剛分離的成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
實驗室分離的人筋膜成纖維采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的人筋膜成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基:基礎培養基,含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
人筋膜成纖維體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
兔子中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)試劑盒 96T/48T
兔子脂聯素(ADP)試劑盒 96T/48T
兔子脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)試劑盒 96T/48T
兔子孕激素/孕(PROG)試劑盒 96T/48T
小鼠補體片段3b受體(C3bR)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat prostate specific aigen (PSA) ELISA Kit 大鼠前列腺特異性抗原(PSA)試劑盒
HumanUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPARELISAkit 人型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanBoneMorphogeneticProtein6,BMP-6試劑盒人骨形成蛋白6(BMP-6)試劑盒規格:96T/48T
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HumanSeptokinase,SKELISAKit人鏈激酶(SK)試劑盒規格:96T/48T
INTS1蛋白抗體
生長因子受體結合蛋白2抗體
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Collagen III (Anti-Collagen Type III 0.5mgCollagen III (Anti-Collagen Type III ) 抗Ⅲ型膠原抗原(Collagen Ⅲ Ⅲ型膠原)
KDR重組人 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 蛋白 Protein
FUT8 Protein Human 重組人 FUT8 蛋白 (aa 68-575, His 標簽)
BST1 Protein Mouse 重組小鼠 CD157 / BST1 蛋白
Collagen III (Anti-Collagen Type III 0.5mgCollagen III (Anti-Collagen Type III ) 抗Ⅲ型膠原抗原(Collagen Ⅲ Ⅲ型膠原)
FUT8 Protein Human 重組人 FUT8 蛋白 (aa 68-575, His 標簽)
IL17F重組大鼠 IL17F / IL-17F 蛋白 Protein
BST1 Protein Mouse 重組小鼠 CD157 / BST1 蛋白
KDR重組人 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 蛋白 Protein
人筋膜成纖維細胞大鼠白介素11(IL-11)試劑盒 ,英文名: IL-11 ELISA Kit
Mouse compleme 1 inhibitor aibody (C1INH) ELISA Kit 小鼠補體1抑制物抗體(C1INH)試劑盒
ELISA 小鼠瘦素受體(mouse Leptin receptor) 進口分裝
CLIAKitforIL-27(humanIerleukin27)ELISAKit人白介素27
通用型精(arginine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
ELISAKitPDGF-AB大鼠血小板衍生生長因子AB