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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

兔脊髓成纖維細胞

產(chǎn)品簡介:

兔脊髓成纖維細胞公司正在出售的產(chǎn)品:跨膜結(jié)構(gòu)域4亞家族成員2抗體 FAM86A蛋白抗體 NCI-H196 [H196]人小細胞肺癌細胞 核受體蛋白NR2E1抗體 HEC265人子宮內(nèi)膜腺癌細胞 原鈣粘蛋白γC3抗體 RMG-I人卵巢癌細胞 大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細胞

產(chǎn)品型號:

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問量:718

更新時間:2024-11-05

產(chǎn)品特性Product characteristics

兔脊髓成纖維細胞

兔脊髓成纖維細胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細胞形態(tài)

貨號

脊髓

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

成纖維細胞樣

YS-01X8368

細胞簡介:

兔脊髓成纖維分離自脊髓組織;脊髓是細細的管束狀的神經(jīng)結(jié)構(gòu),位于脊柱的椎管內(nèi)且被脊椎保護;是源自腦的中樞神經(jīng)系統(tǒng)延伸部分。中樞神經(jīng)系統(tǒng)的細胞依靠復(fù)雜的聯(lián)系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經(jīng)信息。人和脊椎動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的一部分,在椎管里面,上端連接延髓,兩旁發(fā)出成對的神經(jīng),分布到四肢、體壁和內(nèi)臟。脊髓的內(nèi)部有一個H形(蝴蝶型)灰質(zhì)區(qū),主要由神經(jīng)細胞構(gòu)成;在灰質(zhì)區(qū)周圍為白質(zhì)區(qū),主要由有髓神經(jīng)纖維組成;脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發(fā)出許多成對的神經(jīng)(稱為脊神經(jīng))分布到全身皮膚、肌肉和內(nèi)臟器官。脊髓是周圍神經(jīng)與腦之間的通路,也是許多簡單反射活動的低級中樞。按脊神經(jīng)的出入可把脊髓也分為相應(yīng)的31節(jié),31對脊神經(jīng)就是由不同的脊椎發(fā)出的。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來;成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的脊髓成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質(zhì)透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。脊髓成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括:構(gòu)造和維持組織的正常形態(tài);合成和釋放細胞外基質(zhì);組織損傷后及時大量聚集修復(fù)損傷組織。

原代細胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂浮;

  7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;

  3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;

  5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。

方法簡介:

實驗室分離的兔脊髓成纖維采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

實驗室分離的兔脊髓成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細胞形態(tài):成纖維細胞樣

傳代特性:可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%CO25%

兔脊髓成纖維體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

兔脊髓成纖維細胞

細胞傳代及凍存:

細胞傳代步驟細胞凍存步驟
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

  ② 消化培養(yǎng)法

  ③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

  ④器官培養(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

兔脊髓成纖維細胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

(Fibrinogen)   作用:   ELISA   試劑盒   組裝/原裝

Foxp3(Foxp3)   作用:   ELISA   試劑盒   組裝/原裝

半乳糖凝集素 7 Galectin-7    作用:   ELISA   試劑盒   組裝/原裝

胃泌素 (Gasin)   作用:   ELISA   試劑盒   組裝/原裝

磷酸化調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白2抗體

血管動蛋白抗體

FCGR4重組小鼠 CD16-2 / FCGR4 蛋白 (His & AVI 標簽) Protein

Adenylate Kinase 1 (AK-1 0.5mgAdenylate Kinase 1 (AK-1) 腺苷酸激酶-1

FAM19A2重組人 FAM19A2 蛋白  Protein

FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His & AVI 標簽), Biotinylated

CLEC1A Protein Rat 重組大鼠 CLEC僀?僀

Adenylate Kinase 1 (AK-1 0.5mgAdenylate Kinase 1 (AK-1) 腺苷酸激酶-1

FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His & AVI 標簽), Biotinylated

FCGR4重組小鼠 CD16-2 / FCGR4 蛋白 (His & AVI 標簽) Protein

CLEC1A Protein Rat 重組大鼠 CLEC1A / CLEC-1 蛋白

FAM19A2重組人 FAM19A2 蛋白  Protein

小鼠二0酸腺苷(ADP)ELISA 試劑盒

Rat endostatin (ES) ELISA Kit 大鼠內(nèi)皮抑素(ES)試劑盒

Humanactivatedcoagulationfactor,FaELISAKit 人活化Ⅻ(Fa)試劑盒分裝

Humanapoptosissignalregulatingkinase1,ASK-1試劑盒人凋亡信號調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)試劑盒

植物乙醇酸氧化酶(glycolateoxidase)活性比色法定量試劑盒20

Humaissueinhibitorsofmetalloproteinase2TIMP-2ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)試劑盒

兔脊髓成纖維細胞大鼠誘導(dǎo)型合酶(NOS2)試劑盒 ,英文名: NOS2 ELISA Kit

Mouse follistatin (FS) ELISA Kit 小鼠卵泡抑素(FS)試劑盒

Mousemaixmetalloproteinase3,MMP-3ELISAkit 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)試劑盒分裝

CLIAKitforHumanEamoebahistolyticaAigenELISAKit人痢疾內(nèi)阿米巴抗原

細胞3-0酸甘油脫氫酶(GAPDH)活性酶動力比色法定量試劑盒20

ELISAKitACV-RAb大鼠活化素A受體抗體


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