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更新時間：2024-11-05

兔脊髓微血管內皮細胞

商品屬性：

細胞簡介：

兔脊髓微血管內皮分離自脊髓組織；脊髓是細細的管束狀的神經結構，位于脊柱的椎管內且被脊椎保護；是源自腦的中樞神經系統延伸部分。中樞神經系統的細胞依靠復雜的聯系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經信息。人和脊椎動物中樞神經系統的一部分，在椎管里面，上端連接延髓，兩旁發出成對的神經，分布到四肢、體壁和內臟。脊髓的內部有一個H形（蝴蝶型）灰質區，主要由神經細胞構成；在灰質區周圍為白質區，主要由有髓神經纖維組成；脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發出許多成對的神經（稱為脊神經）分布到全身皮膚、肌肉和內臟器官。微血管又稱毛細血管。分布于各種組織和細胞間的微細的血管。介于微動脈和微靜脈之間。平均直徑7-9微米，數量極多，成網狀分布。管壁由一層內皮細胞及一薄層基膜組成，厚約0.5微米。基膜外面有薄層結締組織，其中有纖維細胞、巨噬細胞和周細胞等。細的毛細血管由一個內皮細胞圍成管腔，較粗的毛細血管由2-3個內皮細胞圍成。分布于肌肉組織、神經組織和結締組織中的毛細血管，內皮細胞間為縫隙連接（縫隙寬150埃），稱連續毛細血管；分布于內分泌腺、腎臟等處的毛細血管，除有縫隙連接外，細胞本身有許多小孔，（孔徑800-1000埃），稱有孔毛細血管；分布于肝、脾、骨髓及某些內分泌腺的毛細血管，管腔擴大，稱血竇。毛細血管的管壁薄、通透性大、管徑細（8-10微米）、數量多、血流速度慢，這些特點使其成為血液與組織液進行物質交換的場所，又稱交換血管。血竇（sinusoid）由毛細血管管腔擴大而成，竇壁的一般結構與毛細血管壁相同，由單層內皮細胞構成，內皮細胞膜上有窗孔。不同器官的竇壁結構各有差別。脾血竇的內皮細胞間有較寬裂隙；肝血竇內皮細胞是不連續的，有較寬的細胞隙（0.1-0.5微米）；肝、脾血竇的基膜不完整或無基膜，通透性比毛細血管大，較大的蛋白質和血細胞可以通過。肝血竇壁內有枯否細胞，脾血竇內外有巨噬細胞，這兩種細胞都有吞噬能力，可吞噬清除血液中的異物、細菌等有害物質，是機體單核巨噬細胞系統的重要組成分。某些內分泌腺的血竇有連續的基膜。

方法簡介：

實驗室分離的兔脊髓微血管內皮采用-膠原酶聯合消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

實驗室分離的兔脊髓微血管內皮經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養基：含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態：內皮細胞樣

傳代特性：可傳2-3代

消化液：0.25%

培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔脊髓微血管內皮體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。

細胞傳代及凍存：

原代細胞的培養方法一般有以下4種：

　　① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

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原代細胞的培養條件：

　　一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養

　　1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；

　　2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；

　　3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；

　　4、 胎牛血清濃度為10%-80%

　　5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；

　　6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發生脫落，漂浮；

　　7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；

　　8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。

　　二、懸浮細胞培養

　　1、原代培養時要盡量去除紅細胞；

　　2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行；

　　3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；

　　4、長期培養時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；

　　5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；

　　6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行