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更新時間:2024-11-05
兔顱蓋造骨細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
顱骨 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X8384 |
細胞簡介:
兔顱蓋造骨分離自顱骨組織;造骨細胞(osteoblast)亦稱成骨細胞。是參與骨組織形成的細胞。顱骨位于脊柱上方,由23塊形狀和大小不同的扁骨和不規則骨組成。除下頜骨及舌骨外,其余各骨彼此借縫或軟骨牢固連結,起著保護和支持腦、感覺器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。顱分腦顱和面顱兩部分。腦顱位于顱的后上部,內有顱腔,容納腦,共8塊。面顱為顱的前下部分,包含眶、鼻腔、口腔等結構,構成面部的支架,共15塊。成骨細胞是骨形成的主要功能細胞,負責骨基質的合成、分泌和礦化。骨不斷地進行著重建,骨重建過程包括破骨細胞貼附在舊骨區域,分泌酸性物質溶解礦物質,分泌蛋白酶消化骨基質,形成骨吸收陷窩;其后,成骨細胞移行至被吸收部位,分泌骨基質,骨基質礦化而形成新骨;破骨與成骨過程的平衡是維持正常骨量的關鍵。成骨細胞培養不僅有助于了解骨形成機制、骨骼系統疾病的分子和細胞學基礎,也是藥物篩選、生物材料開發和生物工程研究的重要手段。
方法簡介:
實驗室分離的兔顱蓋造骨采用膠原酶消化法制備而來制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的兔顱蓋造骨經ALP染色檢測,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:梭形、多角形
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔顱蓋造骨體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
小鼠內脂素/內臟脂肪素(visfatin)試劑盒
小鼠內臟脂肪特異性絲酸蛋白酶抑制劑(vaspin)試劑盒
小鼠內皮脂肪酶(EL)試劑盒
小鼠內皮抑素(ES)試劑盒
髓細胞/淋巴細胞或混合譜系白血病蛋白6抗體
BRPF3蛋白抗體
IgG2a重組小鼠 IgG2a-Fc 蛋白 Protein
胞外超氧化物歧化酶(SOD3)重組蛋白 Recombinant Superoxide Dismutase 3, Extracellular (SOD3)
AKR1C2重組人 AKR1C2 蛋白 Protein
CPLX2 Protein Human 重組人 Complexin-2 / CPLX2 蛋白
CD59 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD59 / CD59A / MAC-IP 蛋白
alpha Adaptin/AP1 銜接蛋白α抗原 0.5mgalpha Adaptin/AP1 銜接蛋白α抗原
CPLX2 Protein Human 重組人 Complexin-2 / CPLX2 蛋白
IL6ST重組小鼠 IL6ST / gp130 / CD130 蛋白 Protein
BST1 Protein Rat 重組大鼠 CD157 / BST1 蛋白 (Fc 標簽)
C1D重組人 C1D 蛋白 (GST 標簽) Protein
小鼠熱休克因子1(HSF1)ELISA pcr檢測試劑盒
Human brain naiuretic peptide / brain naiuretic peptide (BNP) ELISA Kit 人腦素/腦尿肽(BNP)試劑盒
HumanEsogen-inducedproteinpS2ELISAKit 人雌激素誘導蛋白PS2pcr檢測試劑盒分裝
guineapigIerferonγ,IFN-γ試劑盒豚鼠γ干擾素(IFN-γ)試劑盒規格:96T/48T
真菌/酵母細胞β-半乳糖苷酶活性化學發光法定量試劑盒20次
MouseCarboxyterminalpropeptideoftypeⅠprocollagen,PⅠCPELISAKit小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)試劑盒規格:96T/48T
兔顱蓋造骨細胞大鼠酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸(NAADP)試劑盒 ,英文名: NAADP ELISA Kit
Mouse thrombin receptor () ELISA Kit 小鼠受體()試劑盒
MouseErythropoietieceptor,EPORELISAKit 小鼠紅細胞生成素受體(EPOR)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforHumanCompleme4,C4ELISAKit人補體蛋白4
細胞CASEINKINASE1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitLebtospira大鼠鉤端IgG
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
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