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廠商性質:經銷商
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更新時間:2024-11-04
小鼠視網膜色素上皮細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
視網膜組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7374 |
細胞簡介:
小鼠視網膜色素上皮分離自視網膜組織;視網膜居于眼球壁的內層,是一層透明的薄膜。視網膜由色素上皮層和視網膜感覺層組成,兩層間在病理情況下可分開,稱為視網膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連,由色素上皮細胞組成,它們具有支持和營養光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網膜分為10層,由外向內分別為:色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內顆粒層、內叢狀層、神經節細胞層、神經纖維層、內界膜。視網膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜,有感光作用;后部鼻側有一視神經乳頭。視網膜上的感覺層是由三個神經元組成。神經元是視細胞層,專司感光,它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網膜上,而視錐細胞則在中心凹處最多。層叫雙節細胞,約有10到數百個視細胞通過雙節細胞與一個神經節細胞相聯系,負責聯絡作用。第三層叫節細胞層,專管傳導。視網膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構,它貼于眼球的后壁部,傳遞來自視網膜感受器沖動的神經纖維跨越視網膜表面,經由視神經到達出口。視網膜的分辨力是不均勻的,在黃斑區,其分辨能力。視網膜色素上皮(RPE)位于脈絡膜和光感受器細胞外節之間,是視網膜下腔和脈絡膜血管之間的離子、水、營養物質和代謝終產物轉運通道;主要是由單層色素上皮細胞所構成,排列十分規則。視網膜色素上皮參與循環,吞噬脫落的光感受器細胞外節以維持光感受器細胞興奮性,并分泌多種生長因子,幫助維持脈絡膜血管內皮細胞和光感受器細胞的結構完整性。細胞呈多角形,細胞分為三部分,即頂部、體部和基底部。視網膜色素上皮細胞無再生能力,細胞死亡后不被替換,而是鄰近的細胞向側面滑動,以填補死亡細胞遺留下來的空間。視網膜色素上皮位于脈絡膜和光感受器細胞外節之間,是視網膜下腔和脈絡膜血管之間的離子、水、營養物質和代謝終產物轉運通道。視網膜色素上皮參與循環,吞噬脫落的光感受器細胞外節以維持光感受器細胞興奮性,并分泌多種生長因子,幫助維持脈絡膜血管內皮細胞和光感受器細胞的結構完整性。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠視網膜色素上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠視網膜色素上皮經PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
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器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
小鼠早期生長反應因子1 英文名稱: Mouse Early Growth Response Protein 1 規格: 英文縮寫: EGR-1
小鼠彈性蛋白 英文名稱: Mouse Elastin 規格: 英文縮寫: ELN
小鼠X 英文名稱: blood coagulation factor X 規格: 英文縮寫: FX
小鼠XIII B 英文名稱: Mouse Coagulation Factor XIII B Polypeptide 規格: 英文縮寫: F13B
小鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human Campylobacter jejuni (PEB1) ELISA Kit 人空腸彎曲菌黏附蛋白(PEB1)試劑盒
HumanN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAGELISAKit 人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitfor(NF-KapB)ELISAKit大鼠核因子κB
飲料乙醇比色法定量試劑盒20次
MouseIerleukin-2receptor,IL-2RELISAKit小鼠白介素2受體(IL-2R)試劑盒規格:96T/48T
巴德-畢德氏綜合征蛋白BBS6抗體
PTCD2蛋白抗體
IL17A重組小鼠 IL17 / IL17A 蛋白 Protein
蛋白激酶Bγ(PKBγ)重組蛋白 Recombinant Protein Kinase B Gamma (PKBg)
TPM4重組人 TPM4 / Tropomyosin 4 蛋白 Protein
CD28 Protein Human 重組人 CD28 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽)
LAYN Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Layilin / LAYN 蛋白
AAT(Alpha-1Anti-tiypsin 0.5mgAAT(Alpha-1Anti-tiypsin) α-1抗(抗原)
CD28 Protein Human 重組人 CD28 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽)
EPHB1重組小鼠 EphB1 / EPHT2 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
IL20RB Protein Rat 重組大鼠 IL20RB 蛋白
CLEC10A重組人 CLEC10A / MGL1 / CD301 蛋白 (Fc 標簽) Protein
小鼠視網膜色素上皮細胞大鼠端粒酶(TE)試劑盒 ,英文名: TE ELISA Kit
Porcine growth hormone (GH) ELISA Kit 豬生長激素(GH)試劑盒
植物源性成分(RBCL)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforLTC4ELISAKit大鼠白三烯C4
體液總脂蛋白(TotalL-Cholesterol)酶連續循環比色法定量試劑盒20次
ELISAKitHSP-70雞熱休克蛋白70
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂?。?/p>
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行