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更新時間:2024-11-04
小鼠外周血單個核細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
外周血 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 圓形 | YS-01X7573 |
細胞簡介:
小鼠外周血單個核分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。外周血單個核細胞(PBMC)即外周血中具有單個核的細胞,包括淋巴細胞和單核細胞。目前,主要的分離方法是密度梯度離心法,因為血液中各有形成分的比重存在差異,因此得以分離出不同的細胞。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠外周血單個核采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠外周血單個核經過檢測,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細胞形態 圓形
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
血管內皮生長因子 A(VEGF-A) 作用: ELISA 規格: 96T 奧地利 Bender
血管內皮生長因子 C(VEGF-C) 作用: ELISA 規格: 96T 奧地利 Bender
血管內皮生長因子 D(VEGF-D) 作用: ELISA 規格: 96T 美國 R&D
血管內皮生長因子受體 1(VEGF-R1) 作用: ELISA 規格: 96T 奧地利 Bender
小鼠抑制素B(INH-B)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human soluble Endoglin (ENG/sCD105) ELISA Kit 人可溶性Endoglin(ENG/sCD105)試劑盒
Humanα-Synuclein,α-SYNELISAKit 人α突觸核蛋白(α-SYN)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitfor6-K-PG(Human6-keto-prostaglandin)ELISAKit人6同前列腺素
飲類異檸檬酸比色法定量試劑盒20次
Mousemaixmetalloproteinase2/GelatinaseA,MMP-2ELISAKit小鼠基質金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)試劑盒規格:96T/48T
補體C3b抗體
SAPS結構域家族3抗體
HA重組甲型流感 H15N8 (A/duck/AUS/341/1983) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
rHBsAg 重組乙肝病毒表面抗原 100ugrHBsAg 重組乙肝病毒表面抗原
ICOS重組人 ICOS / AILIM / CD278 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
CCL4 Protein Human 重組人 CCL4 / MIP1B 蛋白
HGFA Protein Human 重組人 HGFA 蛋白
rHBsAg 重組乙肝病毒表面抗原 100ugrHBsAg 重組乙肝病毒表面抗原
CCL4 Protein Human 重組人 CCL4 / MIP1B 蛋白
HA重組甲型流感 H15N8 (A/duck/AUS/341/1983) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
HGFA Protein Human 重組人 HGFA 蛋白
ICOS重組人 ICOS / AILIM / CD278 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
小鼠外周血單個核細胞大鼠淀粉樣前體蛋白(βAPP)試劑盒 ,英文名: βAPP ELISA Kit
Porcine myelin basic protein (MBP) ELISA Kit 豬髓0脂堿性蛋白(MBP)試劑盒
馬鈴薯特定基因序列(PATA)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforLTA(HumanlymphotoxinAlpha,LTA)ELISAKit人淋巴毒素α
通用96孔1塊
ELISAKitIrna雞免疫核糖核酸
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