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更新時間:2024-11-05
兔小腸血管內皮細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
小腸 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 內皮細胞樣 | YS-01X8452 |
細胞簡介:
兔小腸血管內皮分離自小腸組織;小腸位于腹中,上端接幽門與胃相通,下端通過闌門與大腸相連,是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內,上連胃幽門,下接盲腸,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內消化是至關重要的,因為食物經過小腸內胰液、膽汁和小腸液的化學性消化及小腸運動的機械性消化后,基本上完成了消化過程,同時營養物質被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構成。其結構特點是管壁有環形皺襞,粘膜有許多絨毛,絨毛根部的上皮下陷至固有層,形成管狀的腸腺,其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關系密切;構成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和內分泌細胞與絨毛上皮相似,接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似,絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短,不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運動功能,其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細胞的收縮是負責腸蠕動的動力,促使食物向下運動。血管內皮細胞除了吞噬異物、細菌、壞死和衰老的組織等,還參與集體免疫活動,包括:①血管收縮及血管舒張,從而控制血壓;②凝血(血栓形成及纖維蛋白溶解);③動脈硬化;④血管生成;⑤炎癥及腫脹(浮腫);⑥內皮細胞亦控制一些物質,如白血球進出血管。
方法簡介:
實驗室分離的兔小腸血管內皮采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的兔小腸血管內皮經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:內皮細胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔小腸血管內皮體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
三0酸腺苷酶 英文名稱: Adenosine iphosphate 英文縮寫: ATP
血管緊張素Ⅱ一型受體抗原 英文名稱: Angiotensin 2 Receptor 1 Aigen 英文縮寫: AT1R
抗血管緊張素‖受體︱型自身抗體 英文名稱: Angiotensin 2 Receptor 1 Aoaibodies 英文縮寫: AT1R-AA
血管緊張素Ⅰ 英文名稱: AngiotensinⅠ 英文縮寫: ANGⅠ
9號染色體開放閱讀框79抗體
γS-crystallin蛋白抗體
SERPINA3C重組小鼠 SerpinA3c 蛋白 Protein
CCL1/TCA3/I-309 嗜酸粒細胞趨化蛋白CCL1抗原 0.5mgCCL1/TCA3/I-309 嗜酸粒細胞趨化蛋白CCL1抗原
LGALS8重組人 Galectin-8 / LGALS8 蛋白 Protein
IL17RB Protein Human 重組人 IL17RB / IL-17 Receptor B 蛋白 (Flag 標簽)
ALCAM Protein Rat 重組大鼠 ALCAM / CD166 蛋白 (Fc 標簽僀
CCL1/TCA3/I-309 嗜酸粒細胞趨化蛋白CCL1抗原 0.5mgCCL1/TCA3/I-309 嗜酸粒細胞趨化蛋白CCL1抗原
IL17RB Protein Human 重組人 IL17RB / IL-17 Receptor B 蛋白 (Flag 標簽)
SERPINA3C重組小鼠 SerpinA3c 蛋白 Protein
ALCAM Protein Rat 重組大鼠 ALCAM / CD166 蛋白 (Fc 標簽)
LGALS8重組人 Galectin-8 / LGALS8 蛋白 Protein
豚鼠免疫球蛋白E(IgE)試劑盒 ,英文名: IgE ELISA Kit
Human low density lipoprotein receptor related protein 6 (LRP-6) ELISA Kit 人低密度脂蛋白受體相關蛋白6(LRP-6)試劑盒
MonkeySolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1ELISAKit 猴可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforBid(HumanBH3ieractingdomaindeathagonist)ELISAKit人BH3結構域凋亡誘導蛋白
細菌尿素瓊脂平板50個
RabbitLeptospiraIgG,LepIgGELISAKit兔鉤端IgG(LepIgG)試劑盒規格:96T/48T
兔小腸血管內皮細胞大鼠蛋白激酶抑制因子β(PKIβ)試劑盒 ,英文名: PKIβ ELISA Kit
L selectin (L-Selectin/CD62L) ELISA Kit 人L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑
RatIerleukin3,IL-3ELISAKIT 大鼠白介素3(IL-3)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforCyclin-D2(MouseCyclin-D2)ELISAKit小鼠細胞周期素D2
細胞色素P450亞酶CYP2C8(DBF)活性熒光定量試劑盒20次
Ratfibroblastgrowthfactor-10,FGF-10ELISAKit大鼠成纖維細胞生長因子10(FGF-10)試劑盒規格:96T/48T
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行