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更新時間:2024-11-05
小鼠肺小動脈內皮細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
肺小動脈 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 內皮細胞樣 | YS-01X8494 |
細胞簡介:
小鼠肺小動脈內皮分離自肺小動脈組織;肺動脈干是短而粗的動脈,自右心室的動脈圓錐起始,向左后上方斜升,先在升主動脈根部的前面,繼而至其左側,至主動脈弓的下方,約在第5胸椎高度,分為左、右肺動脈。左肺動脈較短,橫行向左,經左主支氣管前方至左肺門,分兩支進入左肺的上、下葉。右肺動脈較長,橫行向右,經主動脈升部和上腔靜脈的后方達右肺門,分3支進入右肺上、中、下葉。左、右肺動脈的各分支在肺實質內又反復分支,與支氣管的分支伴行,后達肺泡壁,形成稠密的毛細血管網。肺動脈輸送的是含二氧化碳較多的靜脈血。在肺動脈干分叉處稍左側與主動脈弓下緣之間有一結締組織索,稱動脈韌帶。管徑在0.3~1mm之間,為小動脈(small-artery),小動脈包括粗細不等的幾級分支,也屬肌性動脈。較大的小動脈,內膜有明顯的內彈性膜,中膜有幾層平滑肌,外膜厚度與中膜相近,一般沒有外彈性膜。口徑在1mm以下的動脈,管壁有完整的平滑肌層及少量的彈性纖維和膠質纖維。小動脈是決定周圍循環阻力大小的主要因素,也是調節微循環灌注量的“總開關"。典型的小動脈,其管壁的厚度與管徑相比約為1∶2。中膜的肌層相對比其他動脈為厚,當平滑肌在神經支配下強力收縮時,其管腔可以閉塞,而使血液不能流入它所分布的毛細血管內,從而增加了周圍血液循環的阻力。如果有許多小動脈同時收縮,可使血壓顯著上升。反之,當小動脈的平滑肌舒張時,則可使大量的血液流入毛細血管,外周阻力明顯下降,血壓降低。終末小動脈(terminal arteri-ole)的口徑為20~30μm;后小動脈(metar-teriole),又稱毛細血管前小動脈(precapil-lary arteriole)的口徑為12~15μm。管壁內均有較稀疏的平滑肌,在毛細血管前小動脈分支的起始部分,管壁平滑肌成分增厚,叫做毛細血管前括約肌(precapillary sphinc-ter),其收縮或舒張,可調節真毛細血管的血流量,是調節微循環灌注量的“分開關"。支配小動脈平滑肌的交感神經纖維,可延伸到終末小動脈和后小動脈的平滑肌細胞。在毛細血管前括約肌上交感神經纖維特別豐富。肺小動脈內皮細胞呈單層多角形鋪路石狀分布,該細胞在維持血管內外的動態平衡、合成和分泌細胞因子和介質、維持凝血和纖溶的動態平衡中起重要作用。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
實驗室分離的小鼠肺小動脈內皮采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的小鼠肺小動脈內皮經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養基:基礎培養基,含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:內皮細胞樣
傳代特性:可傳1-3代
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
小鼠肺小動脈內皮體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
蔗糖測定試劑盒(紫外比色法)
γ-谷酰半胱酸合成酶(γ-GCS)測定試劑盒(速率法)
超微量ATP酶測試盒(Na+K+、Ca2+Mg2+、T-ATP酶)
總巰基(-SH)測定試劑盒
MAP激酶相互作用絲/蘇激酶1抗體
FBXL18蛋白抗體
ICOSLG重組小鼠 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
chloramphenicol/OVA 氯偶聯雞卵白蛋白蛋白 2mgchloramphenicol/OVA 氯偶聯雞卵白蛋白蛋白
GAPDH重組人 GAPDH 蛋白 (His 標簽) Protein
ACOX1 Protein Human 重組人 ACOX1 / aox 蛋白 (His 標簽)
LDLR Protein Mouse 重組小鼠 LDLR / LDL Recepto僀?僀
chloramphenicol/OVA 氯偶聯雞卵白蛋白蛋白 2mgchloramphenicol/OVA 氯偶聯雞卵白蛋白蛋白
ACOX1 Protein Human 重組人 ACOX1 / aox 蛋白 (His 標簽)
ICOSLG重組小鼠 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
LDLR Protein Mouse 重組小鼠 LDLR / LDL Receptor 蛋白 (His 標簽)
GAPDH重組人 GAPDH 蛋白 (His 標簽) Protein
植物鈣調素(CAM)ELISA 試劑盒
Human ai nuclear factor aibody (ANF) ELISA Kit 人抗核因子抗體(ANF)試劑盒
Porcineadiponectin,ADPELISAKit 豬脂聯素(ADP)試劑盒分裝
CLIAKitforADV-IgM(HumanAdenovirusIgM)ELISAKit人腺病毒IgM
血液氧化應激活性氧(ROS)魯米諾化學發光法定量試劑盒50次
MouseStemcellfactor/mastcellgrowthfactor,SCF/MGFELISAKit小鼠干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)試劑盒
小鼠肺小動脈內皮細胞大鼠鈣/鈣調蛋白依賴性蛋白激酶Ⅱα(CAMK2α)試劑盒 ,英文名: CAMK2α ELISA Kit
Rat beta amyloid (A beta 1-40 1-40) ELISA Kit 大鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)試劑盒
RatTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKIT 大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)試劑盒分裝
CLIAKitforDSIP(Humandeltasleep-inducingpeptide)ELISAKit人促睡眠肽
細胞培養液抗壞血酸比色法定量試劑盒20次
RatHistoneDeacetylase,HDELISAKit大鼠組織蛋白去乙酰化酶(HD)試劑盒
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