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更新時間:2024-11-04
小鼠小腸Cajal間質細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
小腸組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7585 |
細胞簡介:
小鼠小腸Cajal間質分離自小腸組織;小腸位于腹中,上端接幽門與胃相通,下端通過闌門與大腸相連,是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內,上連胃幽門,下接盲腸,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內消化是至關重要的,因為食物經過小腸內胰液、膽汁和小腸液的化學性消化及小腸運動的機械性消化后,基本上完成了消化過程,同時營養物質被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構成。其結構特點是管壁有環形皺襞,粘膜有許多絨毛,絨毛根部的上皮下陷至固有層,形成管狀的腸腺,其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關系密切;構成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和內分泌細胞與絨毛上皮相似,接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似,絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短,不形成紋狀緣。Cajal間質細胞(ICC)是一類主要分布于胃腸道的間質細胞,是胃腸道的起搏細胞和信號傳導細胞,與肌細胞以及末梢神經元有著緊密的關系,具有激發和促進胃腸蠕動的作用。借助于電子顯微鏡技術,清楚觀察到了ICC位置分布和內部精細結構;應用免疫熒光等生化技術,發現了其特殊表達的c-kit蛋白;利用電生理技術,得知多種胃腸動力障礙疾病也與其異常有關。多年來,學者逐漸在胃腸道、膽道、膀胱、子宮等部位發現了ICC的蹤跡,并試圖闡述其與某些疾病的發生機制。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠小腸Cajal間質采用膠原酶消化法結合組織貼塊法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠小腸Cajal間質經c-kit免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
小鼠血管緊張素轉化酶 英文名稱: Angiotensin Conveing Enzyme 規格: 英文縮寫: ACE
小鼠雄激素結合蛋白 英文名稱: Androgen Binding Protein 規格: 英文縮寫: ABP
小鼠促上腺皮質激素 英文名稱: Adrenocor Ticoopic Hormore 規格: 英文縮寫: ACTH
小鼠半胱天冬蛋白酶-3 英文名稱: cysteine-aspaic acid protease-3 規格: 英文縮寫: Active Caspase-3
小鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物(PAP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human lymphotoxin beta (LTB) ELISA Kit 人淋巴毒素β(LTB)試劑盒
Humancholineacetylase,CHAcELISAKit 人乙酰化酶(CHAc)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Chickengrowthhormone,GH試劑盒雞生長激素(GH)試劑盒規格:96T/48T
載玻片細胞CASPASE-8蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
Mousehemeoxygenase1,HO-1ELISAKit小鼠血紅素氧合酶1(HO-1)試劑盒規格:96T/48T
6號染色體開放閱讀框93抗體
α-甘露糖苷酶2x抗體
REG3D重組小鼠 REG3D 蛋白 Protein
Aggrecan 軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原 0.5mgAggrecan 軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原
C7重組人 C7 / Complement component 7 蛋白 Protein
CD96 Protein Human 重組人 CD96 蛋白
IFNA4 Protein Rat 重組大鼠 IFNA4 / IFNα4 / Interferon alpha-4 蛋白 (Fc 標簽)
玻連蛋白(VTN)重組蛋白 Recombinant Vitronectin (VTN)
CD96 Protein Human 重組人 CD96 蛋白
CNDP1重組小鼠 CNDP1 蛋白 Protein
RBP4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 RBP4 蛋白
PPCDC重組人 PPC-DC / PPCDC 蛋白 Protein
小鼠小腸Cajal間質細胞大鼠蛋白聚糖4(PRG4)試劑盒 ,英文名: PRG4 ELISA Kit
Pig angiopoietin 1 (ANG-1) ELISA Kit 豬血管生成素1(ANG-1)試劑盒
病毒H5N1亞型核酸試劑盒(熒光PCR法) 48T
CLIAKitforLptn/LTN/XCL1ELISAKit大鼠淋巴細胞趨化因子
通用免疫化學封閉溶液100毫升
ELISAKitSIgA雞分泌型免疫球蛋白A
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