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更新時間:2024-11-04
小鼠小腦顆粒細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
腦組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 神經元細胞樣 | YS-01X7362 |
細胞簡介:
小鼠小腦顆粒分離自小腦皮層組織;神經元是神經系統最基本的結構與功能單位,小腦顆粒神經元是體積較小的神經元,直徑約10μm,在中樞神經系統中含量非常豐富,近乎神經元數量的一半。由于小腦神經元的生長、分化和大腦皮層神經元相似,而且數量多、便于取材,因此小腦顆粒神經元是研究神經元生長發育、神經軸突再生及神經疾病發生機制和臨床神經藥理的重要手段。小腦顆粒神經元是小腦主要的中間神經元,在哺乳動物的小腦內數量最為豐富。顆粒神經元的軸突與苔狀纖維和爬行纖維相聯系,形成小腦皮層內的神經元環路,在小腦的神經活動中起著非常重要的作用。在動物傳染性海綿狀腦病中,病變可波及小腦顆粒神經元,導致小腦皮層的神經元環路受損,從而呈現神經性行為失調。研究小腦顆粒神經元在動物傳染性海綿狀腦病病理學變化中的反應、病理發生的機理特別是分子機理,有賴于小腦顆粒神經元細胞模型的建立。小腦顆粒細胞的軸突是沿冠狀軸分布的平行纖維,正是這種排列保證了興奮的單向傳導,這是小腦功能理論中的關鍵假設,小腦顆粒細胞通過g-氨基丁酸接受戈爾吉細胞的抑制性突觸的信息傳入。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠小腦顆粒采用消化法結合神經元專用培養基、化學試劑抑制法篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠小腦顆粒經NSE免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養基 含B-27、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 神經元細胞樣
傳代特性 屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
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器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
小鼠胎盤催乳素 英文名稱: Mouse placeal lactogen 規格: 英文縮寫: PL
小鼠纖溶酶原激活劑抑制因子1 英文名稱: Mouse Plasminogen Activator Inhibitor 1 規格: 英文縮寫: PAI-1
小鼠纖溶酶原激活劑抑制因子2 英文名稱: Mouse Plasminogen Activator Inhibitor 2 規格: 英文縮寫: PAI-2
小鼠松弛素 英文名稱: Mouse Relaxin 規格: 英文縮寫: RLN
小鼠糖皮質激素受體β(GR-β)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human ovarian cancer marker-CA125 CA125ELISA 人卵巢癌標志物CA125試劑盒
Humandeoxyuridineiphate,DPELISAKit 人脫氧尿三0酸(DP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Chickenviruseeritis,DEV試劑盒雞病毒性腸病毒(DEV)試劑盒規格:96T/48T
載玻片細胞VEGF蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseEpithelialneuophilactivatingpeptide78,ENA-78ELISAKit小鼠上皮中性粒細胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)試劑盒規格:96T/48T
AF680標記的血管內皮鈣粘蛋白抗體
白細胞分化抗原CD2AP抗體
FGF21重組小鼠 FGF21 / Fibroblast Growth Factor 21 蛋白 Protein
A/H1N1-M2 Human(Avian influenza Matrix Protein-2 Human 0.5mgA/H1N1-M2 Human(Avian influenza Matrix Protein-2 Human) A型人流感病毒H1N1-M2蛋白多肽
CANT1重組人 CANT1 蛋白 (Fc 標簽) Protein
CHI3L2 Protein Human 重組人 CHI3L2 / YKL-39 蛋白
FGFR4 Protein Rat 重組大鼠 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白
蛋白激酶Cη(PKCη)重組蛋白 Recombinant Protein Kinase C Eta (PKCh)
CHI3L2 Protein Human 重組人 CHI3L2 / YKL-39 蛋白
NCSTN重組小鼠 Nicastrin / NCSTN 蛋白 Protein
IL10RA Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL10RA 蛋白 (Fc 標簽)
VAMP3重組人 VAMP3 / Cellubrevin 蛋白 Protein
小鼠小腦顆粒細胞大鼠蛋白激酶Cη(PKCη)試劑盒 ,英文名: PKCη ELISA Kit
N end middle Osteocalcin (N-MID-OT) ELISA Kit 人N端中段骨鈣素(N-MID-OT)試劑盒
Ratsolubleierleukin-1receptorⅠ,IL-1sRⅠELISAkit 大鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforCXCR3(MouseCXC-chemokinereceptor3)ELISAKIT小鼠CXC趨化因子受體3
細胞色素P450亞酶CYP2E1(MFC)活性熒光定量試劑盒20次
RatFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISAKiatFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISAKit大鼠IX(FIX)試劑盒規格:96T/48T