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更新時間:2024-11-05
小鼠淋巴血管內皮細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
淋巴管 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 內皮細胞樣 | YS-01X8510 |
細胞簡介:
小鼠淋巴血管內皮分離自淋巴血管組織;淋巴管由毛細淋巴管匯合而成。其形態結構與靜脈相似,但管徑較細,管壁較薄,瓣膜較多且發達,外形呈串珠狀。淋巴管根據其位置分為淺、深二種。它們管位于皮下,常與淺靜脈伴行,收集皮膚和皮下組織的淋巴。深淋巴管與深部血管伴行,收集肌肉和內臟的淋巴。淺、深淋巴管之間有廣泛的交通支。淋巴管在向心行程中,通常經過一個或多個淋巴結,從而把淋巴細胞帶入淋巴液。主要功能是濾過淋巴液,產生淋巴細胞和漿細胞,參與機體的免疫反應。當局部感染時,細菌、病毒或癌細胞等可沿淋巴管侵入,引起局部淋巴結腫大。如該淋巴結不能阻止和消滅它們,則病變可沿淋巴管的流注方向擴散和轉移。淋巴管內皮細胞(LEC)是襯覆于淋巴管內表面的一種單層扁平上皮,是構成淋巴管壁的主要結構,參與維持體液平衡,調節淋巴細胞再循環和機體的免疫反應和組織液及蛋白質的運輸,在疾病過程中也起著重要作用。近年研究表明,LEC還在傷口愈合、淋巴管水腫和炎癥擴散等病理過程中起重要作用,而且與腫瘤轉移密切相關。淋巴管內皮細胞主要功能:①調節體液、蛋白和組織壓力平衡;②為免疫系統的重要組成部分。淋巴管內皮細胞與主要病生理變化:①囊腫型淋巴管瘤;②淋巴管炎;③淋巴結核。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
實驗室分離的小鼠淋巴血管內皮采用-膠原酶聯合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的小鼠淋巴血管內皮經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:內皮細胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
小鼠淋巴血管內皮體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
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器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
小鼠β內啡肽受體(β-EPR)試劑盒
小鼠β內啡肽(β-EP)試劑盒
小鼠β甘露糖苷酶(βManase)試劑盒
小鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)試劑盒
SBNO1蛋白抗體
磷酸化叉頭蛋白家族1抗體
BACE1重組小鼠 BACE-1 蛋白 Protein
Clenbuterol Hydrochloride/BSA 鹽酸克偶聯牛血清白蛋白BSA 1mgClenbuterol Hydrochloride/BSA 鹽酸克偶聯牛血清白蛋白BSA
LSAMP重組人 LSAMP 蛋白 Protein
F3 Protein Human 重組人 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 蛋白
CD38 Protein Mouse 重組小鼠 SCARB3 蛋白
Clenbuterol Hydrochloride/BSA 鹽酸克偶聯牛血清白蛋白BSA 1mgClenbuterol Hydrochloride/BSA 鹽酸克偶聯牛血清白蛋白BSA
F3 Protein Human 重組人 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 蛋白
BACE1重組小鼠 BACE-1 蛋白 Protein
CD38 Protein Mouse 重組小鼠 SCARB3 蛋白
LSAMP重組人 LSAMP 蛋白 Protein
小鼠黑色素細胞抗體(MC Ab)ELISA pcr檢測試劑盒
Rat thioredoxin reductase (xR) ELISA Kit 大鼠硫氧還蛋白還原酶(xR)試劑盒
humanglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISAKit 人谷脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)pcr檢測試劑盒分裝
Humanai-neuophilgranulesaibody,ANGA試劑盒人抗中性粒細胞顆??贵w(ANGA)試劑盒規格:96T/48T
植物乳酸脫氫酶(LDH)總活性酶動力比色法定量試劑盒20次
HumanUlaSensitiveProstateSpecificAigen,PSAUSELISAKit人超敏前列腺特異性抗原(PSA-US)試劑盒規格:96T/48T
小鼠淋巴血管內皮細胞大鼠酪酸3/色酸5單加氧酶激活蛋白ζ(YWHAζ)試劑盒 ,英文名: YWHAζ ELISA Kit
Mouse inducible niic oxide syhase (iNOS) ELISA Kit 小鼠誘導型合成酶(iNOS)試劑盒
RatParathyroidHormone-LikeRelatedProtein,PTHrPELISAKit 大鼠甲狀旁腺激素相關蛋白(PTHrP)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforF-TESTOELISAKit大鼠游離睪同
細胞黑色素(MELANIN)染色試劑盒50次
RatprocollagenⅢN-terminalpeptide,PⅢELISAKit大鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢ)試劑盒規格:96T/48T
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