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更新時間:2024-11-04
小鼠心肌細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
心臟組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7267 |
細胞簡介:
小鼠心肌分離自心臟組織;心臟是脊椎動物身體中最重要的一個器官,主要功能是為血液流動提供壓力,把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構成,左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開,故互不相通,心房與心室之間有瓣膜(房室瓣),這些瓣膜使血液只能由心房流入心室,而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動,向器官、組織提供充足的血流量,以供應氧和各種營養物質,并帶走代謝的終產物(如二氧化碳、無機鹽、尿素和尿酸等),使細胞維持正常的代謝和功能。心肌細胞呈菱形、多邊形等不規則形狀;細胞培養2h后開始貼壁,呈梭形;到12h左右,細胞開始伸出偽足,呈菱形、多角形;分離培養48h以后,大部分伸出偽足、呈巴掌狀,部分心肌細胞會出現搏動;心肌細胞為終末分化細胞,在體外不增殖。體外培養的心肌細胞可保持結構及功能上的某些特點,并具有自發性節律搏動,且心肌細胞的培養具有簡便、定量、重復性好以及不受神經體液因素的影響等特點。利用培養的心肌細胞在探索非血液動力學因素所致的心肌肥厚的調節,研究心肌細胞的生物力學、凋亡、受體下調、缺血預處理、信號通路、對作用于心臟的新藥進行篩選并對其安全性進行評價以及從培養的心肌細胞中提取有價值的生物因子等方面具有廣闊的應用前景,對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠心肌采用膠原酶-聯合消化法結合差速貼壁法,并用化學試劑抑制法篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠心肌經α-Sarcometric actin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 梭形、多角形
傳代特性 屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
小鼠髓過氧化物酶試劑盒 小鼠髓過氧化物酶試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠髓過氧化物酶試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠髓過氧化物酶試劑盒、小鼠髓過氧化物酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠透明質酸試劑盒 小鼠透明質酸試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠透明質酸試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠透明質酸試劑盒、小鼠透明質酸eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠脫氫表雄試劑盒 小鼠脫氫表雄試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠脫氫表雄試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠脫氫表雄試劑盒、小鼠脫氫表雄eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠戊糖素試劑盒 小鼠戊糖素試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠戊糖素試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠戊糖素試劑盒、小鼠戊糖素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat cyclic guanosine monophosphate (cGMP) ELISA Kit 大鼠環0酸鳥苷(cGMP)試劑盒
Humanoctameranscriptionfactor2B,OTF2BELISAKit 人八聚體轉錄因子(OTF2B)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Chickenβ-lactamase試劑盒雞β內酰胺酶(β-lactamase)試劑盒規格:96T/48T
載玻片細胞βAMYLOID蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseEotaxin1ELISAKit小鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)試劑盒規格:96T/48T
AF750標記的晚期糖基化終末產物特異性受體抗體
半乳糖凝集素3抗體
PDGFRA重組人 PDGFRa / CD140a 蛋白 (Fc 標簽) Protein
原A(PGA)重組蛋白 Recombinant Pepsinogen A (PGA)
GH1重組人 GH1 / Growth hormone 1 蛋白 Protein
CHIT1 Protein Human 重組人 Chitotriosidase / Chitinase 1 / CHIT1 蛋白
HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/New Caledonia/20/1999) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
原A(PGA)重組蛋白 Recombinant Pepsinogen A (PGA)
CHIT1 Protein Human 重組人 Chitotriosidase / Chitinase 1 / CHIT1 蛋白
PDGFRA重組人 PDGFRa / CD140a 蛋白 (Fc 標簽) Protein
HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/New Caledonia/20/1999) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
GH1重組人 GH1 / Growth hormone 1 蛋白 Protein
小鼠心肌細胞大鼠蛋白激酶Cε(PKCε)試劑盒 ,英文名: PKCε ELISA Kit
N- acetyl beta -D- Glucosaminidase (NAG) ELISA Kit 人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)試劑盒
RatIerleukin16,IL-16ELISAKIT 大鼠白介素16(IL-16)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforCXCR3ELISAKit大鼠CXC趨化因子受體3
細胞色素P450亞酶CYP3A(END)活性比色法定量試劑盒20次
RatFactor-relatedApoptosis,FASELISAKit大鼠凋亡相關因子(FAS/CD95)試劑盒規格:96T/48T
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂?。?/p>
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行