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更新時間:2024-11-05
兔全骨髓細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
骨髓 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 圓形 | YS-01X8419 |
細胞簡介:
兔全骨髓分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質間的網眼中,是一種海綿狀的組織,能產生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。全骨髓細胞即骨髓內除紅細胞外的全部細胞。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
實驗室分離的兔全骨髓采用沖洗骨髓、紅細胞裂解法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的兔全骨髓經過檢測,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:懸浮
細胞形態:圓形
傳代特性:不增殖;不傳代
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔全骨髓體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
乙酰轉移酶 英文名稱: Rat acetylansferase 英文縮寫: ChAT
大鼠降鈣素 英文名稱: calcitonin 英文縮寫: CAL
大鼠環0酸腺苷 英文名稱: cyclic adenosine monophosphate 英文縮寫: CAMP
大鼠環0酸鳥苷 英文名稱: Cyclic guanosine monophosphate 英文縮寫: cGMP
FbxW2蛋白抗體
死亡相關轉錄因子1抗體
FKBP1A重組小鼠 FKBP12 / FKBP1A 蛋白 (His 標簽) Protein
Bassoon(BSN 0.5mgBassoon(BSN)
PTPRJ重組人 DEP1 / PTPRJ 蛋白 (aa 997-1337, His 標簽) Protein
CA5B Protein Human 重組人 Carbonic Anhydrase VB / CA5B 蛋白 (His 標簽)
CDH1 Protein Rat 重組大鼠 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 蛋白
Bassoon(BSN 0.5mgBassoon(BSN)
CA5B Protein Human 重組人 Carbonic Anhydrase VB / CA5B 蛋白 (His 標簽)
FKBP1A重組小鼠 FKBP12 / FKBP1A 蛋白 (His 標簽) Protein
CDH1 Protein Rat 重組大鼠 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 蛋白
PTPRJ重組人 DEP1 / PTPRJ 蛋白 (aa 997-1337, His 標簽) Protein
羊表皮生長因子(EGF)ELISA 試劑盒
Human ai epidemic hemorrhagic fever virus IgM aibody (EHF) ELISA Kit 人抗流行性出血熱病毒抗體IgM (EHF)試劑盒
Humanacetylcholine,ACHELISAKit 人乙酰(ACH)試劑盒分裝
CLIAKitforADAM8(MouseADisiegrinAndMetalloprotease8)ELISAKIT小鼠解整合素樣金屬蛋白酶8
血液脂蛋白相關0脂酶A2(LPPLA2)活性比色法定量試劑盒20次
Mousepulmonaryactivatioegulatedchemokine,PARCELISAKit小鼠肺部活化調節趨化因子(PARC/CCL18)試劑盒
兔全骨髓細胞大鼠活化素B(ACV-B)試劑盒 ,英文名: ACV-B ELISA Kit
Rabbit cystatin / cystatin C (Cys-C) ELISA Kit 兔半胱蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)試劑盒
桿菌(BA)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMousepulmonaryactivatioegulatedchemokine,PARCELISAKit小鼠肺部活化調節趨化因子
體液元素比色法定量試劑盒20次
ELISAKitColⅣ人Ⅳ型膠原
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